产品详情
文献和实验
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保存条件 :-20℃
保质期 :一年
库存 :现货
供应商 :上海经科化学科技有限公司
规格 :100T
产品简介:支原体污染会对细胞各个方面都造成不良影响,已经成为细胞培养中高度重视的问题,因此,定期进行支原体污染检测是十分必要的。本支原体检测试剂盒采用 PCR 方法,特异性的检测各种培养细胞生物材料(如细胞培养物、实验动物分泌物、动物血清等)中支原体的污染。试剂盒使用的混合引物是针对支原体 16s rRNA 序列的保守区域设计的特异性引物,可直接使用细胞培养液作为 PCR 模板,特异性扩增支原体 DNA。使用本产品一小时内即可完成检测,检测灵敏度高,可检测低至20 个拷贝的支原体。
产品组分:
产品编号 | 产品名称 | 规格 |
BL1469A-1 | Mycoplasma PCR Mix(2×) | 1 mL |
BL1469A-2 | Mycoplasma Primer Mix | 200 μL |
BL1469A-3 | Positive Control | 50 μL |
BL1469A-4 | Mycoplasma Free Water | 1 mL |
使用方法(仅供参考):
1、样品准备:取适量待检细胞培养上清于洁净的 PCR 管中,利用 PCR 仪 95℃热处理 5 min 后作为模板。血清样本可利用 Mycoplasma Free Water 稀释后,取适量样本于洁净的 PCR 管中,利用 PCR 仪 95℃热处理 5 min 后作为模板;
2、PCR体系配制:每次实验需设置阴性对照(将 1 μL 待检样品换成等量的 Mycoplasma Free Water)与阳性对照(在 1 μL 待检样品中加入 0.5 μL Positive Control 后一起作为 Template),实验时戴一次性口罩与手套,谨慎操作,防止操作不当引入外源支原体污染;
组分 | 20ul体系 |
Template | 1 μL |
Mycoplasma Primer Mix | 2 μL |
Mycoplasma PCR Mix(2×) | 10 μL |
Mycoplasma Free Water | 补至 20 μL |
步骤 | 温度 | 持续时间 | 循环数 |
预变性 | 98℃ | 2 min | 1 |
变性 | 98℃ | 20 s | 30 |
退火 | 56℃ | 25 s | |
延伸 | 72℃ | 10 s | |
延伸数据采集 | 72℃ | 5 min | 1 |
5、结果分析:每次实验通过与阴性对照、阳性对照检测结果比较确认样品支原体污染情况,阳性条带大小 500 bp 左右。如阴性对照检测结果中有条带很有可能是 PCR 体系中出现污染,建议重新实验确认结果。如有必要,也可对 PCR 产物进行常规测序,以确定具体的支原体种属。
注意事项:
1、本试剂盒可以检测 M. orale,M. arginini,M. bovis,M. fermentans,M. gallisepticum,M. hominis,M. pirum,Ureaplasma spp,M. hyorhinis,M. pneumoniae,A. laidlawii 等至少 11 种以上支原体污染。
2、所有试剂在使用前于冰上彻底解冻、混匀,使用完毕后于-20℃保存。
3、每次实验必须设置阴性对照、阳性对照,实验组建议设置样品模板梯度。
4、操作时必须佩戴口罩,严格按照 PCR 操作标准,防止引入外源污染影响实验结果。
5、为了确保细胞实验的可靠性及稳定性,建议定期进行支原体污染检测。
6、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
上海经科化学科技有限公司
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