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保存条件 :4℃
保质期 :一年
库存 :现货
供应商 :上海经科化学科技有限公司
规格 :50T
产品简介:本非变性PAGE凝胶制备试剂盒包含非变性凝胶制备所需的全部试剂。本试剂盒可配制30-50块常规大小(8×10 cm)的非变性PAGE胶。
由于采用非连续Laemmli凝胶系统(Tris-Glycine系统),电泳凝胶系统pH在8.3-8.8,因此要求待分离的蛋白等电点pI<8.0(酸性蛋白),这样蛋白在凝胶系统内带负电荷,pI越低于8.0,带更多的负电荷,在凝胶电泳中才能正常向正极泳动。
产品组分:
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 保存条件 |
BL1336A-1 | 30%PAA(29:1) | 100 ml | 4℃,避光 |
BL1336A-2 | 4×分离胶缓冲液 pH8.8 | 100 ml | RT |
BL1336A-3 | 4×浓缩胶缓冲液 pH6.8 | 50 ml | RT |
BL1336A-4 | 10%APS(干粉) | 0.5 g | RT,配制后-20℃ |
BL1336A-5 | TEMED | 0.5 ml | 4℃,避光 |
使用方法:
一、配制10% APS-5 ml
将0.5 g APS干粉溶于5 ml超纯水中,彻底溶解后分装,1 ml/支,-20℃备存,每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间,以防失效。10%APS在4℃有效期为一周,-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20℃保存的10% APS。
二、配制分离胶
1、根据表一,将不同体积的成分在小烧杯中混合;先后加入TEMED和10%APS,轻轻搅拌混匀,避免产生气泡。
2、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
3、静置15-20分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,说明凝胶已聚合。
三、配制浓缩胶
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、根据表一,将不同成分在一个小烧杯中混合;先后加入TEMED和10%APS,轻轻搅拌混匀,避免产生气泡。
3、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
4、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
5、静置30-60分钟,等待浓缩胶聚合。
上海经科化学科技有限公司
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