Protein A/G抗体纯化试剂盒

保存条件 ：4℃

保质期 ：两年

库存 ：现货

供应商 ：上海经科化学科技有限公司

规格 ：1 mL/5 mL

产品简介：

Protein A和Protein A/G抗体纯化磁珠系列产品是利用蛋白偶联技术使 Protein A和Protein A/G共价包被到 NHS 活化的超顺磁性微球表面。该产品具有抗体结合能力高、蛋白非特异吸附率低以及洗脱条件均一的特点，一步纯化即可从血清样品中分离出纯度大于90%的抗体。微米级磁珠提供的超大比表面积，大幅缩短抗体与抗原吸附所需的平衡时间，15 min 内即可完成抗体吸附过程，30 min 内完成抗体纯化流程。本抗体纯化磁珠试剂盒配有经过优化的预制缓冲液，为抗体纯化实验提供了最佳的反应条件，增强了抗体纯化实验的稳定性。

本产品粒径为2μm，结合 Human IgG 能力（Antibody Capacity）为1.8~2.0 mg/mL，广泛应用于血浆、腹水、组织培养上清液等样品中的抗体纯化，也可用于抗体固定及其它相关研究。操作者可根据目标抗体的种属来源及亚型选择磁珠的类别，Protein A，Protein A/G 磁珠与不同抗体的亲和性比较参见附表 1。

 

产品组分：

编号	产品名称	BL1264A	BL1264B
1	抗体纯化磁珠	1 mL	5 ml
2	抗体结合缓冲液	100 mL	500 ml
3	抗体洗脱缓冲液I（pH4.5）	50 mL	250 ml
4	抗体洗脱缓冲液II（pH2.0）	50 mL	250 ml
5	抗体中和缓冲液	10 mL	50ml
6	磁珠洗涤缓冲液	10 mL	50ml
7	磁珠储存缓冲液	10 mL	50ml
8	磁珠再生缓冲液	10 mL	50ml

 

 

使用方法（仅供参考）：详见说明书。

 

注意事项：

1、本产品须与磁性分离器配套使用。

2、磁珠使用前应充分振荡均匀。

3、磁珠应保存在储存溶液中，防止干燥。

4、请勿将磁珠冷冻或离心，以免引起不可逆聚集。

5、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

常见问题及解答：

Q1：如何提高抗体与磁珠结合效率?

A1：磁珠与抗体的结合效率与抗体的种属来源及所属亚型有关，请确认抗体的类型与 Protein A 配基的亲和效率（附表 1），如抗体所属亚型与 Protein A 的亲和度较低，可以通过增加抗体与磁珠的孵育时间（30~120 min）、提高结合缓冲液的 pH 值（8~9）及降低离子强度（25~100 mM NaCl）等方法提高亲和效率，或选择与目标抗体具有更高亲和度的配基（如 Protein A/G）。

Q2：如何提高抗体洗脱效率？

A2：抗体与Protein A配基亲和度太高导致抗体洗脱效率低，可以通过降低洗脱缓冲液的 pH 值（1.9~2.5）、增大洗脱缓冲液的离子强度（可选用2~3 M MgCl₂）或延长洗脱时间，提高抗体的洗脱效率。但应注意抗体在低pH条件下容易形成聚集物，抗体洗脱产物应马上用碱性缓冲剂（如 Tris、HEPES 等）调节 pH 至中性。

Q3：如何避免磁珠在储存或使用过程中可能出现的聚集情况？

A3：磁珠应保存在 2～8℃，使用时应避免由于污染而导致的不可逆聚集，或因干燥而导致的聚集。磁珠在低pH 的洗脱缓冲液中发生聚集属于正常现象，不影响磁珠的正常使用。在 Binding buffer 和 Elution buffer 中添加终浓度为 0.1%（v/v）的非离子型去垢剂（如 NP-40、Tween-20 或 Triton X-100）可有效防止磁 珠聚集。经过低pH 洗脱操作的磁珠可以用结合缓冲液洗涤至中性，然后用含有 0.1% （v/v）Tween-20 的 Tris buffer（pH7.5）振荡重悬磁珠，并用超声波水浴处理 2 min，即可使磁珠恢复均匀状态，以上处理均不影响磁珠的抗体结合效率。

Q4：如何解决磁珠易粘附管壁的现象？

A4：建议使用低吸附率的耗材进行磁珠操作。另外，在缓冲液中添加 0.01%～0.1%（v/v）的非离子型去垢剂（如 NP-40、Tween-20 或 Triton X-100)可以有效降低磁珠对耗材的粘附。

Q5：磁珠在使用过程中出现结块现象？

A5：磁珠在使用时如果出现结块现象一般较难振荡打散，容易导致分布不均，出现该问题的原因是磁珠在磁场中放置太久而使磁珠牢固的结合在一起。用超声波水浴处理 2 min 即可打散磁珠使其重新分散，但应注意超声处理也会使磁珠在样品溶液中捕获的抗体脱落，所以磁珠在加样后洗脱前不宜使用该方法。

 

保存条件：

4℃保存，保质期2年。