无缝克隆试剂盒

保存条件 ：-20℃

保质期 ：一年

库存 ：现货

供应商 ：上海经科化学科技有限公司

规格 ：50T

产品简介：

本产品是基于同源重组以及大肠杆菌的自我修复功能设计一款无需酶切连接、高效、快速、价格优惠的体外重组试剂盒，能够将任意含有载体末端重叠区域的DNA片段重组至线性化载体上，不受酶切位点限制，载体自连背景极低。该方法的实现需要在插入片段正/反向 PCR 引物的 5’端引入线性化载体上的 15~25 nt 末端序列，通过重组酶的作用使得具有重叠区域的片段和载体最快在 50℃ 5 min 内重组，完成无缝克隆。

本产品可同时实现 1~5 个 DNA 片段的重组，2×Seamless Cloning Mix 中添加的辅助因子和优化的反应体系使产品具有更高的阳性率和兼容性。

 

图1. 核心原理：同源重组及大肠杆菌自我修复

  

产品特点：

1. 操作简单，节省时间，可在5-60min内完成重组

2. 不需要考虑载体及序列的酶切位点问题，可将目的序列任意插入载体的任意位置

3. 不会引入额外序列

4. 可同时连接多个片段（1-5）

 

产品组成：

组分	50 T
2×Seamless Cloning Mix	250 μL
pUC19 Control Plasmid, Linearized (Ampr, 40 ng/μl) *	5 μL
Control Fragment (500 bp, 20 ng/μl)**	5 μL

 

*线性化载体，可与试剂盒提供的线性化片段重组，排除实验其他影响因素；

**线性化片段，可与试剂盒提供的线性化载体重组，排除实验其他影响因素。

  

使用方法：

详见说明书。

 

注意事项：

 

1. 对于多个片段的重组反应，重组效率通常会低于单个片段的重组效率，建议胶回收纯化后再进行重组反应。对于3个以上片段的重组反应或重组片段大于5kb时，强烈建议在胶回收后再进行重组反应。通常胶回收后，重组效率可提高2-10倍
2. 载体和片段的比例推荐1:2~3，可根据具体条件进行适当的调整，但比例不应低于1:1。
3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品；
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

有效期：

避免反复冻融，-20 ℃保存1年。