动物组织中甲醛脱氢酶（FDH）活性检测试剂盒微量法价格

保存条件：2-8°C

保质期：6个月

英文名：Formaldehyde Dehydrogenase (FDH) Activity Assay kit （Animal Samples）

库存：999

供应商：北京索莱宝科技有限公司

CAS号：BC4985-100T/96S

规格：100T/96S

动物组织中甲醛脱氢酶（FDH）活性检测试剂盒说明书

微量法

货号：BC4985

规格：100T/96S

产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称	规格	保存条件
提取液	液体110 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂一	液体15 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂二	粉剂×2支	-20℃保存
试剂三	粉剂×2支	2-8℃保存
试剂四	液体2 mL×1瓶	2-8℃保存

溶液的配制：

1、试剂二：临用前加入0.25 mL蒸馏水，充分混匀；用不完的试剂-20℃分装保存两周，避免反复冻融。（1瓶粉剂溶解后可做100T，为了延长使用时间，此产品多给1瓶粉剂）

2、试剂二工作液：根据试验所需用量，按照试剂二（μL）∶蒸馏水（μL）=1∶29比例配成工作液，现配现用。试剂二工作液当天配制当天用完。

3、试剂三：临用前加入0.6mL蒸馏水，充分溶解；用不完的试剂2-8℃分装保存两周。

产品说明：

甲醛脱氢酶存在于绝大多数原核生物以及所有的真核生物中，是一种将甲醛进行转换的氧化还原酶。甲醛脱氢酶可催化甲醛和NAD⁺产生NADH，在340nm处的吸光值会增加，测定340nm处的吸光值变化，可计算得到甲醛脱氢酶的活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、恒温培养箱/水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

组织：按照动物组织质量（g）：提取液体积（mL）=1∶5~10的比例（建议称取0.1 g动物组织，加入1 mL提取液），冰浴匀浆，8000 g，4℃条件下离心10 min；取上清（若上清不够澄清，建议重复上述离心步骤）置于冰上待测。

二、测定步骤

1、紫外分光光度计/酶标仪预热30 min以上，调节波长至340 nm，蒸馏水调零。

2、临用前将试剂一、试剂四置于37℃预热10 min。

3、在微量石英比色皿或96孔UV板中依次加入 20 μL 样本、110 μL试剂一、50 μL试剂二工作液、10 μL试剂三、10 μL试剂四，充分混匀后于340nm处测定20s时的吸光值A1，迅速置于37℃水浴或培养箱5min（酶标仪有控温功能可将温度调至37℃），拿出迅速擦干测定5min20s时的吸光值A2。计算ΔA=A2-A1。

三、动物组织中甲醛脱氢酶活性计算

A、按微量石英比色皿计算

1、按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白每分钟催化生成1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。

FDH酶活（U/mg prot）=ΔA÷（ε×d）×V反总×10⁹÷（V样×Cpr）÷T×F=321.54×ΔA÷Cpr×F

2、按样本质量计算：

单位的定义：每g组织每分钟催化生成1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。

FDH酶活（U/g 质量）=ΔA÷（ε×d）×V反总×10⁹÷（V样×W÷V样总）÷T×F=321.54×ΔA÷W×F

ε：NADH 摩尔消光系数，6220L/mmol/cm；d：比色皿光径，1 cm；V反总：反应体系总体积，2×10^-4L；V样：加入样本体积，0.02 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；10⁹：单位换算系数，1mol=10⁹ nmol；F：稀释倍数。