α半乳糖苷酶（αGAL）测试盒

供应商 ：上海联祖

库存 ：22

检测方法 ：微量法、可见分光光度法

规格 ：100管/48样/50管/24样

商品属性：

产品名称	α半乳糖苷酶（αGAL）测试盒
规格	100管/48样  50管/24样
测试方法	微量法、可见分光光度法
货号	LZ-S01244

商品介绍：
测定意义
α-GAL (EC 3.2.1.22)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，能专一地催化α半乳糖苷键的水解，主要参与棉子糖、水苏糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL对于植物种子的萌发至关重要，种子萌发初期，其催化产生的D-半乳糖通过糖酵解途径迅速转化和消耗，为种子的萌发提供最初的能量来源，后期则主要参与细胞壁储藏多糖水解。
测定原理：
α-GAL分解对--α-D-吡喃半乳糖苷生成对-酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算α-GAL活性。
自备用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤（以组织样本为例）：
1、样本处理：称取1g组织于玻璃管中，加入1mL 6mol/L HCl，放入110℃烘箱中6~12h，离心机16000g 25℃离心20min，取上清液至新离心管中 ，然后加10mol/L NaOH调节pH至7.0。
2、试剂准备：
1）Substrate：加入8mL Substrate Diluent溶解。（现配现用）
2）Dye Reagent：加入4mL Dye Reagent Diluent溶解。（现配现用）
3）标准品：加入1mL蒸馏水溶解Standard得到Standard①；从Standard①取10μL加入990μL蒸馏水中得到Standard②；取200μL Standard②加入800μL蒸馏水中，制备得到浓度为200μmol/L的Standard。



\商品介绍：
测定意义
MDH （EC 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物， 连接多条重要的代谢途径。因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH， NADP-MDH主要存在于真核细胞中。
测定原理：
NADP-MDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。




注意事项：
1.阳性对照H2O2一般使用浓度为100 μM （推荐浓度50-200 μM，具体依细胞类型而定） 。通常刺激后30 min-4 h可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞，活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后30 min内观察不到活性氧的升高，可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果荧光信号过强，可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。
2.实验过程中，如果阴性对照细胞荧光也比较强，可以按照1:2000-1:5000 稀释荧光探针DCFH-DA，使DCFH-DA的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间可在15-60 min 内适当进行调整，尽量缩短读片时的曝光时间，并且试验组、对照组曝光时间需保持一致。
活性氧阳性对照 (H2O2) 仅仅用于作为阳性对照的样品，并非所有试验组样品中都需加入活性氧阳性对照。
3.探针装载后，一定要洗净未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
优势：
1.提供了详细的样品制备和结果计算方法；
2.提供标准品和标准曲线作参考；
3.经过多种样本验证；动植物组织、细胞、血清、血浆，细菌等样本均已经过了验证，高度的兼容和匹配度，让您的样本充分发挥作用，不浪费。
4.无放射性，安全稳定；无放射性试剂，其保质期长达一年以上，排除客观因素的干扰。
5.操作便捷；步骤简单，2小时内完成检测。

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