DIG RNA标记混合物

库存 ：90

供应商 ：ROCHE

规格 ：40 μL

 

检测时间：135分钟
样本材料
线性化质粒DNA：
待转录的DNA将会被克隆至含有SP6，T7或T3 RNA聚合酶启动子并相邻于多接头的合适转录载体的多接头位点。对于“流失”转录本的合成，质粒是通过限制性酶进行线性化的。限制性酶生成的5′-突出应当被使用；3′ 突出应当被避免。线性化的模板DNA应当通过酚氯仿抽提及乙醇沉淀进行纯化，以避免RNase的污染。对于′run around′转录环状质粒DNA会被使用。
PCR产物：
含有RNA聚合酶启动子序列的PCR片段也可被用作转录的模板。推荐在转录之前对PCR片段使用HIghPure柱进行纯化。


内含物
10x 溶液带有：10 mM ATP, CTP, GTP (各), 6.5 mM UTP, 3.5 mM DIG-11-UTP.

特异性

热灭活：添加 2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0) 终止反应。

应用

 

• Northern blots[1]
• Southern blots
• 斑点印迹
• 菌斑或克隆提升
• RNase保护实验
• 染色体, 细胞, 及组织切片原位[2][3]