产品详情
文献和实验
相关推荐
肿瘤类型 :否
供应商 :上海研生
库存 :47
生长状态 :贴壁
是否是肿瘤细胞 :否
细胞形态 :圆形、卵圆形或多角形细胞
物种来源 :圆形、卵圆形或多角形细胞
组织来源 :圆形、卵圆形或多角形细胞
规格 :5×10⁵Cells/T25培养瓶
一、基本信息细胞名称 | 大鼠卵巢表面上皮细胞 | 组织来源 | 卵巢组织 |
商品货号 | YS-01X7833 | 种属来源 | 大鼠 |
包被条件 | 换液频率 | 每2-3天换液一次 | |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 圆形、卵圆形或多角形细胞 |
传代特性 | 根据细胞特性 | 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培养基 | 原代角质形成细胞培养体系 | 培养条件 | 气相:空气 ,95%; CO2 , 5% |
细胞简介 |
大约85%的卵巢癌来源于卵巢表面上皮 ,它的发生是一个多因素作用、多基因参 与、经过多个阶段才终形成的及其复杂的生物学过程。 因此 ,体外培养卵巢表 面上皮细胞为研究卵巢表面上皮的功能及其逐步癌变过程对卵巢癌的防治起着重 要作用。此外 ,有研究表明 ,表皮生长因子对卵巢表面上皮细胞的生长和状态十 分有益。 |
质量检测:实验室分离的大鼠卵巢表面上皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
大鼠卵巢表面上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,大鼠卵巢表面上皮细胞以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
大鼠卵巢表面上皮细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈圆形、卵圆形或多角形细胞 ,在技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,
37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度
的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内
加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验
器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL
(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
原代细胞培养方法及注意事项:
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
公司正在出售的产品:
大鼠肝癌细胞;RH-35 | 腺苷酸环化酶5封闭多肽 |
大鼠肝癌细胞;CBRH-7919 [CBRH7919] | BLAME封闭多肽 |
大鼠脑胶质瘤细胞;C6 | 钠/氢交换样结构域蛋白1封闭多肽 |
大鼠肝细胞;BRL 3A | 1号染色体开放阅读框53封闭多肽 |
大鼠肺泡巨噬细胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1] | 核受体蛋白NR2E1封闭多肽 |
正常大鼠肾细胞;NRK-52E | 抑制素α/Inhibin α封闭多肽 |
大鼠胸大动脉平滑肌细胞;A7r5 | 转录因子LBX1封闭多肽 |
大鼠雪旺细胞;RSC96 | 睾丸发育蛋白SPATA16封闭多肽 |
大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1) | RUVBL1封闭多肽 |
大鼠胰腺外分泌腺肿瘤细胞;AR42J | 成纤维细胞生长因子20封闭多肽 |
大鼠乳腺癌细胞;MADB106 | 钠离子肌醇转运蛋白封闭多肽 |
大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-1 | 白介素1α前肽/IL-1α前肽封闭多肽 |
大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E | 大鼠卵巢表面上皮细胞输卵管特异性糖蛋白封闭多肽 |
正常大鼠肾细胞;NRK | 轴突导向受体封闭多肽 |
大鼠腹水癌细胞;Walker/LLC-WRC 256 | 磷酸化酪氨酸激酶A封闭多肽 |
上海研生实业有限公司
实名认证
钻石会员
入驻年限:7年