产品详情
文献和实验
相关推荐
肿瘤类型 :否
供应商 :上海研生
英文名 :26
生长状态 :贴壁
是否是肿瘤细胞 :否
细胞形态 :梭形、多角形
物种来源 :大鼠
组织来源 :眼球
规格 :5×10⁵Cells/T25培养瓶
大鼠小梁网细胞
一、基本信息
细胞名称 | 大鼠小梁网细胞 | 组织来源 | 眼球 |
商品货号 | YS-01X7372 | 种属来源 | 大鼠 |
包被条件 | 换液频率 | 每2-3天换液一次 | |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 梭形、多角形 |
传代特性 | 可传2-3代 | 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 | 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
细胞简介 |
大鼠小梁网细胞分离自眼球组织;小梁网由角膜基质纤维、后界膜和角膜内皮向后扩展而成,覆盖在巩膜静脉窦的内侧。小梁网细胞在眼内压调节中起着关键作用;小梁网细胞内有特定的神经递质和神经肽受体,其中包括乙酰胆碱和神经肽Y。青光眼是由于眼内压力升高而造成的一种不可逆致盲眼病,小梁网细胞的体外培养是青光眼病因学研究的重要手段之一。在小梁网细胞中,一长串的血管活性多肽和生长因子能够触发细胞内信号传导机制,小梁网细胞可合成不同类型的细胞外基质蛋白以及金属蛋白酶。形态学观察可见,刚从组织块长出的原代细胞,形态各异,多数呈星状或不规则形。细胞有胞突,核椭圆形,胞体肥大,胞浆丰富,且可见吞噬颗粒。随着细胞的增生及相互融合为单层,细胞的形态趋于一致。胞浆的色素颗粒及胞突消失,排列紧密呈类似上皮细胞的扁椭圆形或不规则形。胞体透亮,包膜清晰。 |
质量检测:实验室分离的大鼠小梁网细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
大鼠小梁网细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
大鼠小梁网细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈梭形、多角形 ,在技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,
37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度
的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内
加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验
器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL
(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
原代细胞培养方法及注意事项:
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的
混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒
入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化
时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即
终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,
加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在
7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
公司正在出售的产品:
猴胎肾细胞 | 磷酸化雷帕霉素靶蛋白封闭多肽 |
家兔骨髓间充质干细胞 | p53激活蛋白2封闭多肽 |
豚鼠肋肌成纤维样细胞 | LARP4蛋白封闭多肽 |
BALB/c小鼠胚胎细胞 | PWWP域包含蛋白2封闭多肽 |
抗鼠CD8单克隆细胞系 | 铜代谢结构域蛋白8封闭多肽 |
小鼠诱导性多潜能干细胞 | A型流感病毒H5N1神经氨酸酶1封闭多肽 |
猪静脉血管内皮细胞 | 囊泡相关膜蛋白4封闭多肽 |
人慢性髓系白血病细胞(白介素21基因修饰) | 肝再生磷酸酯酶2封闭多肽 |
人慢性髓系白血病细胞(白介素15基因修饰) | ATP依赖RNA解旋酶DDX60样蛋白封闭多肽 |
人急性单核细胞白血病细胞(白介素21基因修饰) | 发育相关蛋白ERCC6L/乙醇致畸因子封闭多肽 |
人急性单核细胞白血病细胞(白介素15基因修饰) | 驱动蛋白C3封闭多肽 |
犬细支气管上皮细胞 | 糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白封闭多肽 |
小鼠肾脏内髓集合管上皮细胞 | 大鼠小梁网细胞GTP发育调控结合蛋白1封闭多肽 |
大长舌果蝠肌肉细胞 | 促肾上腺皮质激素ACTH(18-39)封闭多肽 |
大鼠肌肉成纤维样细胞 | G蛋白偶联受体C5家族亚型D封闭多肽 |
上海研生实业有限公司
实名认证
钻石会员
入驻年限:7年