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文献和实验
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肿瘤类型 :否
供应商 :上海研生
库存 :54
生长状态 :贴壁
是否是肿瘤细胞 :否
细胞形态 :长梭状细胞
物种来源 :大鼠
组织来源 :胎盘组织
规格 :5×10⁵Cells/T25培养瓶
基本信息:细胞名称:大鼠胎盘间充质干细胞
组织来源:胎盘组织
商品货号:YS-01X7708
种属来源:大鼠
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
包被条件:
培养基:原代间充质干细胞培养体系
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁生长
细胞形态:长梭状细胞
传代特性:根据细胞特性
传代比例:
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气 ,95%; CO2 , 5%
细胞简介:
胎盘间充质干细胞是一种多能干细胞 ,是具有自我复制能力的多潜能细胞。在一 定条件下 ,它可以分化成多种功能细胞。在胚胎发育中来源于中胚层。在机体正 常的组织损伤修复过程中 , MSC是一种重要的参与组织再生的细胞库。在组织损 伤引起的特殊信号作用下 , MSC迁移到受损部位 ,在局部聚集增殖 ,依据不同的 损伤信号沿着不同途径分化。 MSC易于分离扩增 ,体外倍增能力旺盛 ,即使扩增 1亿倍仍能保持其多向分化能力。 因此 , MSC是一种实用的组织修复种子细胞。
相较于其他干细胞 ,胎盘间充质干细胞具有来源方便 ,细胞数量充足 ,易于分离 、培养、扩增和纯化 ,传代扩增30多代后仍具有干细胞特性。胎盘是目前间充质 干细胞的佳来源。
原代细胞试用的实验类型:
原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:
一、细胞增殖检测:
常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验
原代细胞培养方法及注意事项:
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤
掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色
偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
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