DNA气溶胶污染去除剂

DNA气溶胶污染去除剂

价格: ¥3744

品牌:西格

货号:XG-P3011

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保质期 : 3 年

供应商 :上海西格

保存条件 :-20°C 以下

规格 :100ml

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!
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XG-P3011 DNA气溶胶污染去除剂 100ml

描述:气溶胶是悬浮于气体介质中粒径一般为 1 nm ~ 1 mm 的固体、液体微小粒子形成的胶溶状态散体系,其分 散并悬浮在气体介质中的核酸聚合物,广泛存在于实验室 桌面、仪器、耗材以及空气中。 DNA 气溶胶与核酸扩增过程(PCR、LAMP 等)相 伴相生。空气与液体面摩擦、离心机离心、剧烈地摇动反 应管、PCR 开盖、移液器的反复吸样、污染物的外泄等 途径,都会产生 DNA 气溶胶。分子实验室作为科研和临 床检验场所,PCR(或 LAMP)的使用频率较高,且样本 和扩增目标经常出现多批次相同的情况,DNA 气溶胶污 染在实验区域内不断累积,污染风险不断增加,假阳性的 发生频率也越来越高。PCR 等技术的高扩增效率,产生 的核酸气溶胶污染,会导致检测结果的假阳性。假阳性意 味着实验不可信,并且直接造成实验室经济损失。更严重 的是,如果形成气溶胶污染,则可引起整个 PCR 实验室 的污染,甚至要关闭实验室。 由于 DNA 高耐热性、高吸附能力、对有机溶剂的高 耐受性特点,无论采用高压灭菌、清水冲洗、酒精擦洗均 不能彻底去除 DNA 污染。 全新开发的强力核酸 酶(DNA Cleaning 酶),可在室温 15min 内彻底将 DNA 污染物降解为 2-6 bp 的寡核苷酸,无论是移液器、PCR 仪、耗材、实验室桌面上的 DNA 吸附污染物均被酶解。 DNA 被酶解后,DNA Cleaning 酶可在 60℃烘干 10min 或者 70%酒精擦拭后不可逆失活,从而避免后续对实验 的影响。该制品不含任何有机毒性溶剂,无毒、无腐蚀性, 不对设备造成任何损伤。

 储存: -20℃可保存 3 年。 




PCR反应基本步骤:
一般的聚合酶链式反应由20到35个循环组成,每个循环包括以下3个步骤:
变性(Denaturation):
利用高温(93-98℃)使双链DNA分离。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前,通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离,仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟,接下来PCR仪就控制温度进入循环阶段。
退火或称接合,复性(Annealling)
在DNA双链分离后,降低温度使得引物可以结合于单链DNA上。此阶段的温度通常低于引物熔点5℃。错误的退火温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。
延伸(Extension):
DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。传统的Taq估计合成1000bp/min、较新的Tbr(来自于嗜热菌Thermus brockianus)约40秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。

 

PCR 反应需要使用哪些试剂?
一、模板DNA:PCR反应需要模板DNA,如从细胞、组织、血液中提取DNA等;
二、引物:PCR反应的两个引物,分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域,引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物;
三、dNTPs:PCR反应中需要四种dNTPs,包括脱氧腺苷酸(dATP)、脱氧胸苷酸(dCTP)、脱氧鸟苷酸(dGTP)、脱氧胞嘧啶酸(dTTP),用于细胞分裂、DNA合成等生物学过程,用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增;四、Taq DNA聚合酶:PCR反应需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等,用于扩增DNA链;
五、PCR buffer溶液:对PCR反应具有缓冲作用,调节反应pH,硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛,可增强PCR反应特异性,从而提高反应效率;
六、酶切体系:PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤,常常需要进行酶切操作。
七、MARK:一种分子量标准,用来判别DNA片段大小的工具。
八、DNA纯化试剂盒:用于纯化PCR反应产物;


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