1×Fast Taq MasterMix(purple)   (2×Taq Mix快速扩增即用型预混液)

1×Fast Taq MasterMix(purple) (2×Taq Mix快速扩增即用型预混液)

价格: ¥312

品牌:西格

货号:XG-P2801

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库存 :41

保质期 :12 个月

供应商 :上海西格

保存条件 :-20℃

规格 :1ml×5

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!

保存条件:-20℃保存。
产品介绍:
1×Fast Taq预混液中包括Fast Taq DNA聚合酶,dNTPs,染料及PCR反应所需的缓冲液,是一种即用型PCR扩增试剂。使用时,只需加入引物和DNA模板即可进行PCR扩增, 引物和模板的加入总体积可以在1-10μl间变动,具有很强的可调性。该PCR预混液能节省实验时间,避免了常规PCR试剂多次加样造成的实验污染。预混液本身含有染料,扩增完成后可直接上样,进行电泳检测。

Fast Taq DNA聚合酶扩增速度为6kb/分钟。扩增1kb以下片段时,延伸时间设置为5秒∕kb;扩增1kb至5kb以下片段时,延伸时间设置为10秒∕kb;
扩增5kb以上片段时,延伸时间设置为15秒∕kb。如遇困难模板时,延伸时间设置为20秒∕kb。
产品用途:常规PCR扩增,菌落PCR,TA克隆用的PCR片段扩增,RT-PCR。



 
货号 产品名称 规格
XG-P2801 1×Fast Taq MasterMix(purple)   (2×Taq Mix快速扩增即用型预混液) 1ml×5
XG-P2801 1×Fast Taq MasterMix(purple)   (2×Taq Mix快速扩增即用型预混液)  
PCR反应基本步骤:
一般的聚合酶链式反应由20到35个循环组成,每个循环包括以下3个步骤:
变性(Denaturation):
利用高温(93-98℃)使双链DNA分离。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前,通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离,仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟,接下来PCR仪就控制温度进入循环阶段。
退火或称接合,复性(Annealling)
在DNA双链分离后,降低温度使得引物可以结合于单链DNA上。此阶段的温度通常低于引物熔点5℃。错误的退火温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。
延伸(Extension):
DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。传统的Taq估计合成1000bp/min、较新的Tbr(来自于嗜热菌Thermus brockianus)约40秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。


PCR 反应需要使用哪些试剂?
一、模板DNA:PCR反应需要模板DNA,如从细胞、组织、血液中提取DNA等;
二、引物:PCR反应的两个引物,分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域,引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物;
三、dNTPs:PCR反应中需要四种dNTPs,包括脱氧腺苷酸(dATP)、脱氧胸苷酸(dCTP)、脱氧鸟苷酸(dGTP)、脱氧胞嘧啶酸(dTTP),用于细胞分裂、DNA合成等生物学过程,用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增;四、Taq DNA聚合酶:PCR反应需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等,用于扩增DNA链;
五、PCR buffer溶液:对PCR反应具有缓冲作用,调节反应pH,硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛,可增强PCR反应特异性,从而提高反应效率;
六、酶切体系:PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤,常常需要进行酶切操作。
七、MARK:一种分子量标准,用来判别DNA片段大小的工具。
八、DNA纯化试剂盒:用于纯化PCR反应产物;

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