承接各类实验服务 实时荧光定量及半定量RT-PCR实验代测

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价格: ¥50 - 500

产品详情

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承接各类实验服务 实时荧光定量及半定量RT-PCR实验代测

PCR实验代测服务

 

服务内容:
1.制定个性化实验方案:根据不同的实验目的确定实验方案、选定合适的内参;
2.检测类别:mRNA、miRNA、lncRNA、DNA
3.样本抽提及质检:对客户提供样本进行RNA抽提,并利用NanoDrop进行样本质检;
4.定量PCR预实验:包括样本反转录为CDNA、配置PCR反应体系及进行Real-TimePCR反应;
5.正式定量PCR实验:根据预实验结果进行正式实验;
6.数据分析:采用2- △△CT法进行分析,比较不同样本间差异。

 

 

服务要求:
1.请提供组织样本,细胞样本,血浆或血清样本,totalRNA;
2.请提供已知的全长基因序列或GeneBank号;
3.请提供尽可能详细的背景资料:DNA/RNA来源、基因丰度等。

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送样运输要求:

 

1. 样品处理

 

a. 动物组织:常规组织,脂肪组织,结缔组织,纤维化组织适当增加。将组织剪切成合适大小后(建议组织块长宽高均不大于0.5 cm),然后迅速完全浸泡于5~10倍体积的RNA保护液中。(注意:已浸入RNA olidTM试剂中的组织经平衡一段时间后,可从溶液中取出,切成更小的组织块,再重新放回RNAolidTM试剂中;有些比较弱的液体渗透性组织如骨头等,不适合用RNAolidTM试剂进行RNA保护。)

 

b.植物组织:新鲜的叶、果肉、种子最少100 mg。将嫩叶,嫩茎组织切成合适的大小(建议长宽高均不大于0.5 cm)后,然后迅速完全浸泡于5~10倍体积的RNA olidTM试剂中。(注意:某些植物组织天生具有的屏障,如叶子表面的蜡层可阻碍RNA olidTM试剂的渗透,对于此类组织,通常需破坏这些屏障层以允许溶液的浸透。)

 

c.细胞等样本:收集不小于10^6个细胞的沉淀(用PBS清洗1-2次)。之后迅速加入5~10倍体积的RNAolidTM试剂。

 

d.酵母、细菌等样本:离心弃上清,收集小米粒大小的单菌体沉淀,然后迅速加入适量的RNAolidTM试剂完全浸没菌体沉淀。


e. RNA样品: OD260/280为1.8-2.0,浓度≥100 ng/μL,体积≥20μL,干冰运输。

 

f.cDNA:cDNA原液≥20 μL,干冰运输。

 

 2. 样品保存及运输

 

加入有RNATM试剂的样本可在37℃保存1~2天,2天以后部分组织中的RNA会开始降解。室温(25℃)稳定保存1周,不会有明显的RNA降解发生。大部分样品置于RNAolidTM试剂中,4℃条件下可稳定保存1个月,不会有明显的RNA降解发生。长期存放可先将保存在RNAolidTM试剂中的样本4℃浸透过夜,然后将RNAolidTM试剂吸出弃去,再将样本放入-20℃或-80℃长期稳定保存3~5年。



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