植物原花青素-试剂盒

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供应商 ：信帆生物

植物原花青素试剂盒
（ Oligomeric Proantho Cyanidins,OPC 分光光度法）
一、测定意义
原花色素（Oligomeric Proantho Cyanidins，OPC）是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物，广泛存在于植物的各种器官中，具有极强的抗氧化性和清除自由基的作用，广泛的应用于医药，食品，化妆品，保健品行业。
二、测定原理
在酸性条件下，植物原花青素 A 环上的间苯二酚和间苯-三酚与香草醛发生缩合反应，产生有色化合物，在500nm 处有特征吸收峰，测定 500nm 光吸收值，可计算植物原花青素的含量。
三、自备实验用品及仪器。
天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、蒸馏水、盐酸、甲醇和 60%乙醇。
四、试剂组成和配制(50T/24 样)
提取液：60%乙醇，自备，4℃保存。（30mL 无水乙醇溶于 20mL 蒸馏水）
试剂一：8%盐酸 20mL，自备，4℃保存。（1.6mL 盐酸溶于 18.4mL 甲醇）
试剂二：粉剂 0.125g×1 瓶，4℃避光保存，临用前加12.5mL 甲醇溶解。
标准品：原花青素标准品 2mg×1 支，4℃保存。
工作液：临用前将试剂一和试剂二按照 1:1 体积比混合，需多少配多少。
空白工作液：将试剂一和甲醇按照 1:1 体积比 混合。
五、OPC 提取
将样本烘干至恒重、粉碎、过 40 目筛，称取约 0.1g，加入 2mL 提取液（鲜样可以先液氮研磨成粉再称重，然后加提取液。或者直接称重后加提取液机械匀浆），用超声提取法进提取，超声功率 300W，破碎 5s，间歇 8s，提取 30 min，然后 10000 rpm/min，25℃离心 10min，取上清待测。
九、注意事项
1、配置好的试剂二应尽快使用，此溶液在 4℃保存时间不超过一个月。
2、吸光度变化应该控制在 0.05-0.5 之间，否则加大样品量或稀释样品，注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变。
3、最低检测限为 0.1mg/mL。
4、花青素含量较高的有色样本相对干扰较大，植物原花青素为无色物质。
5、本实验吸光值测定也可用酶标仪进行（取 200-300μL反应液读数），波长不变。
植物原花青素试剂盒