环7肽库筛选|多肽文库筛选|文库构建

环7肽库筛选|多肽文库筛选|文库构建

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提供商 :卡梅德生物科技(天津)有限公司

服务名称 :环七肽库筛选|多肽文库筛选

    卡梅德生物提供的噬菌体展示平台是一种超高通量配体筛选方法。噬菌体展示平台可以构建高达1013/ml的肽或在噬菌体上展示的抗体克隆。经过随后几轮的生物筛选,卡梅德生物可以提供多达105个经过验证的肽或抗体序列,为后续酶底物、蛋白质配体和高特异性抗体的搜索提供了坚实的研究基础。基于噬菌体展示平台,卡梅德生物可以为客户构建7肽库、12肽库和环7肽库等。

    环化修饰可以赋予肽一些优势,这些优势累积起来使它们更像药物。通过环化限制肽是模拟蛋白质二级结构(例如肽环)或产生与其线性类似物相比具有增强构象稳定性的肽的常用策略。KMD生物科学构建了C7C噬菌体展示肽库,旨在构建高质量的肽环化文库。

环状噬菌体展示肽库的应用:

   噬菌体展示自循环肽是发现蛋白质-蛋白质相互作用的大环抑制剂的一种有效且可扩展的方法。

   环肽非常适合靶向蛋白质-蛋白质相互作用。由于其受限制的结构,环肽在结合时受益于较低的熵惩罚,并且通常表现出高亲和力和特异性。与线性肽相比,它们进一步显示出增加的稳定性和细胞渗透性。众所周知的天然产物衍生的环状化合物,如环孢菌素A,启发了该领域的研究。环状肽的基因编码文库越来越多地用于寻找环状化合物。这样的文库可以通过多种方法产生,如噬菌体展示、信使核糖核酸展示和分裂内含子环连接。双环肽噬菌体文库可以进一步通过化学交联产生。噬菌体展示得益于大的文库大小和易于实验。高度多样化的环状M13肽噬菌体展示文库可以通过设计半胱氨酸残基侧翼的随机肽序列来产生。然而,二硫键的可逆性质限制了这些循环在细胞内环境中的适用性。

在酶抑制剂中的应用。

   据报道,环肽可抑制蛋白酶、磷酸酶、蛋白酶体、HIV整合酶和dam甲基转移酶。环化肽在抑制酶活性方面一直受到学术界的重视。许多小组已经研究了肽的环化以增强其抑制活性。例如,登革热病毒的NS2b-NS3蛋白酶是通过蚊子叮咬传播的严重病毒感染。目前还没有具体的治疗方法。NS2b-NS3蛋白酶是一个很好的抗病毒靶点,因为它是病毒成熟和传染性所必需的。

在核糖核酸-蛋白质相互作用抑制剂中的应用。

   RNA与蛋白质的结合过程会受到环状肽的干扰。在实验室研究中,几个小组发现环肽可以破坏RNA-蛋白质相互作用的多个过程,包括:翻译起始、延伸、前mRNA剪接和病毒复制。

环七肽库构建

  C7C噬菌体展示肽库基于与M13噬菌体的小外壳蛋白(pIII)融合的随机肽的组合文库。显示的肽在pIII的N末端表达,即成熟蛋白的第一个残基是第一个随机化位置。肽之后是短间隔区(Gly-Gly-Gly Ser),然后是野生型pIII序列。

   环化肽更能抵抗蛋白水解,增加蛋白质渗透性,并能增强其亲和力,同时保持其选择性。这就是为什么环状肽是研究和调节蛋白质-蛋白质相互作用的一种越来越有趣的支架。

   通过化学合成合成环状7聚体肽的随机寡核苷酸片段,然后将其插入噬菌体载体的外壳蛋白编码基因中,并通过基因工程重组技术转化到大肠杆菌中。增殖和产生的噬菌体表面携带外源肽,每个噬菌体表面表达一种外源肽。所有这些噬菌体构成了一个预制的环状7噬菌体展示肽库。

噬菌体展示肽库筛选:

   客户提供的靶分子用于从整个预制环7噬菌体展示肽库中经过筛选、扩增和选择步骤,获得能够与靶分子高亲和力结合的单克隆抗体。通过测定该噬菌体的DNA序列,可以知道噬菌体携带的肽的氨基酸序列。富集的环肽显示出对靶蛋白的高亲和力,并且可以用作内源性蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)的抑制剂。


 

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