支链淀粉含量试剂盒

库存 ：100

供应商 ：信帆生物

支链淀粉含量试剂盒
（比色法 50T/48 样）
一、测定原理：
利用 80％乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开，利用双波
长比色法测定支链淀粉含量
二、自备仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 比色皿、乙
mi（或石-油醚）和蒸馏水。
三、试剂组成和配制：
试剂一：液体 50mL×1 瓶；4℃保存；
试剂三：液体 60mL×1 瓶；4℃保存；
试剂四：液体 5mL×1 瓶； 4℃保存；
试剂五：液体 1mL×1 瓶；4℃保存。
试剂六：支链淀粉标准品 10mg×1 支；4℃保存。（配置方法
见后面标准曲线制备）
四、样本前处理：
干样：先于研钵中研碎（或液氮下研碎）成细粉状，然后称
取 0.01~0.02g（建议称取约 0.01g）于 EP 管中，加入 1mL 试
剂一，充分混匀约 30s，80℃水浴提取 30min，4000 转/分钟
常温离心 5min，弃上清，留沉淀，加入 1mL 试剂二振荡混
匀 5min，4000 转/分钟常温离心 5min，弃上清，留沉淀（吸
到最后剩余的试剂二无法准确吸出，可以将 EP 管置于 37℃
烘箱中烘 5-10 分钟后取出），加入 1mL 试剂三充分混匀，
90℃水浴 10min 溶解，冷却后待测。
鲜样：称取约 0.1g，加入 1mL 试剂一，封闭研磨匀浆，取出
80℃水浴提取 30min，4000 转/分钟常温离心 5min，弃上清，
留沉淀，加入 1mL 试剂二振荡混匀 5min，4000 转/分钟常
温离心 5min，弃上清，留沉淀（吸到最后剩余的试剂二无
法准确吸出，可以将 EP 管置于 37℃烘箱中烘 5-10 分钟后
取出），加入 1mL 试剂三充分混匀，90℃水浴 10min 溶解，
冷却后待测
七、测定意义：
支链淀粉是高度分支的多糖，淀粉中直链淀粉和支链淀粉的
比例和含量对淀粉产品的加工、物化特性、糊化温度等有着直
接的影响，对于不同比例直、支链淀粉的研究具有重要意义。
八、注意事项：
1、样本前处理中加试剂三前尽量让乙-mi（或石-油醚）蒸发干
净，然后震荡混匀将沉淀分散开，以便于 90℃水浴后能
充分溶解；
2、乙-mi（或石-油醚）吸取比较困难，可以选择玻璃移液器，
有些微体积误差不影响实验；
3、标准品为支链淀粉纯品，加入试剂三后常温即可溶解，标
准曲线只需做一次；
4、样本前处理好后，需要取 1-2 个相对差异较大的样本作预
试，以确定样本最佳浓度（一般建议选择样本测定 OD 值
在 0.2 左右的浓度来测定）。
5、支链淀粉显色为棕红色，样本测定时可能会有直链淀粉颜
色干扰而看不到原本的颜色，但不影响吸光值测定。
6、如酶标仪有相应波长，也可以将最后的显色液吸取
200-300μL 进 96 孔板，在相应波长（550nm 和 743nm）
下读取其吸光值，此时必须自己制作标准曲线用同样的方
式读数。
支链淀粉含量试剂盒