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供应商 :信帆生物
细胞丙二醛(MDA)测定试剂盒(微板法)
二、操作步骤:
1、样本前处理:弃去细胞培养上清,用细胞刮将细胞刮下,用移液器将细胞转移到塑料离心管中,
加试剂五提取液 0.5ml,混匀 2 分钟,将细胞破碎(可用玻璃匀浆器手动匀浆或者
超声破碎)制成悬液,取样 0.1ml 于 1.5ml 离心管中(预先用酒精灯加热针头在管
盖上刺一小孔)。
四、测试原理
过氧化脂质降解产物中的丙二醛(MDA)可与硫代巴-比妥酸(TBA)缩合,形成红色产物,在532nm 处有最大吸收峰。因底物为硫代巴-比妥酸(Thibabituric Acid TBA)所以此法称 TBA 法。
五、测定意义:
机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸 (polyunsaturated fatty acid,PUFA),引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化物。如:醛基(丙二醛 MDA)、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基,以及新的氧自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,即非自由基性的脂类分解产物,而且通过链式或链式支链反应,放大活性氧的作用。因此,初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成,这些分解产物中,一些是无害的,另一些则能引起细胞代谢及功能障碍,甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸(PUFA)的过氧化引起细胞损伤,而且还能通过脂氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤。因而测试 MDA 的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度,间接地反映出细胞损伤的程度。
MDA 的测定常常与 SOD、XOD、NO、T-AOC、MAO、POD、脂褐质、FFA、LPS、总酯酶、
TG、TC、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白的测定相互配合,SOD 活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力,而 MDA 的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度,通过 SOD 与 MDA 的结果分析有助于医学、生物学、药理及工农业生产的发展。
细胞丙二醛(MDA)测定试剂盒
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