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文献和实验
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库存 ：大量
英文名 ：MIF
CAS号 ：00002
保质期 ：1年
供应商 ：上海瓦兰生物
保存条件 ：-20°
规格 ：50ul
| 基因调 控方式 |
基因名称 | 物种 | 基因ID | 基因大小 | 转录本 | 载体名称 | 备注1 |
| 过表达 | MIF | 人 | 4282 | 345bp | NM-002415.2 | pCDH-EF1a-CoGFP- PURO- SFFV-MIF -myc-WPRE | 1.病毒量:≥1x108TU,病毒滴度:≥1x108TU/mL,Puro抗性元件, 约8-10管； 2.含myc标签 |
| 对照 | CoGFP | pCDH-EF1a-CoGFP- PURO- SFFV-MCS WPRE | 1.病毒量:≥1x108TU,病毒滴度:≥1x108TU/mL,Puro抗性元件,约8-10管; |
慢病毒感染快速指南
1. 将目的细胞按 30%汇合度接种到 24 孔板，约 3-5×104细胞数/孔，不同细胞因为细胞大
小不同细胞数量会不同，快速指南以细胞数量为 5×104为例，加入 500uL 完全培养基进行
细胞培养。
2. 接种后 12-20h 感染阴性对照慢病毒（接种细胞至病毒感染细胞时间不宜太长，否则细胞
增殖影响细胞密度不利用后期抗性筛选）。
3.加病毒量计算方法：（细胞数×MOI 值/病毒滴度）×103=病毒量（uL），加病毒量见下表。
同时加入 Polybrene，每孔加 0.25uL，浓度为 10mg/mL Polybrene，细胞培养液中终浓度为
5ug/mL。
病毒液滴度
（TU/mL）
MOI=10
（uL）
MOI=20
（uL）
MOI=40
（uL）
MOI=80
（uL）
MOI=100
（uL）
4×108TU/mL
1.25uL
2.5uL
5uL
10uL
12.5ul
4.感染 16-20h 后更换培养基，弃去培养基，每孔加入 500uL 新鲜的培养基。
5.感染后 48-96h 显微镜观察荧光。（注：如果 48h-96h 期间细胞汇合度达到 100%，请及时
传代培养）
6.建议将 48 孔板细胞进行传代，传代 12 孔板，后继续观察荧光，根据细胞状态和荧光细
胞比例综合判断细胞感染最佳 MOI 值。一般选择细胞生长良好，感染效率 80%左右的感染
条件作为最佳感染条件。（注：100%荧光感染不一定为细胞最佳 MOI 值，因为可能会造成
细胞慢病毒感染拷贝数太高，影响细胞状态）
上海瓦兰生物科技有限公司
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