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文献和实验
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产品介绍 RNA 上的化学修饰对于RNA的结构和功能起到了重要的调控作用,阐明RNA修饰的生物学意义需要能特异性检测、量化修饰核苷进行高灵敏度分析的工具。目前常用的检测方法,主要采用液相色谱与质谱联用(coupling of liquid chromatography to mass spectrometry, LC-MS) 技术。表观生物利用SCIEX Triple Quad 4500质谱平台,可精确检测10种常见的RNA修饰类型在各类样本中的修饰丰度。
仪器信息 液质联用仪:Applied Biosystems型号:ExionLC AD / SCIEX Triple Quad 4500离子源:TurbolonSpray色谱柱:Agilent ZORBAX SB-Aq column(4.6 × 50 mm;填料尺寸1.8 μm)
修饰检测
RNA:m1A、m6A、m5C、pseudoU、4SU、5EU 、m7G、m6Am、N6,N6-mA、ac4C
可单独提供以下DNA修饰类型检测:6mA、5mC、5hmC、5hmU
样品要求
RNA样本,≥ 200 ng/样本(至少3次技术重复数据)
服务周期
20个工作日
结果示例
1. 原始数据:MS intensity-time数据,包括总离子色谱图(TIC)和单离子峰图(XIC)。
2. 样品修饰比例定量:标准曲线数据和样品定量结果。
案例
Mol Cancer:FBW7通过靶向N 6-甲基腺苷结合蛋白YTHDF2抑制卵巢癌的发展[1]本研究鉴定了FBW7在卵巢癌中的潜在底物,并在体外和体内模型研究FBW7的生物学效应。利用LC/MS检测了卵巢癌组织中的m6A水平,再通过meRIP-seq和RNA-seq评估YTHDF2的下游靶标,综上表明FBW7通过拮抗卵巢癌中的YTHDF2介导的BMF mRNA衰变来抑制肿瘤的生长和进展。LC-MS/MS检测敲降YTHDF2敲降组与对照组的RNA m6A水平
参考文献
[1] Xu F, Li J, Ni M, et al. FBW7 suppresses ovarian cancer development by targeting the N6-methyladenosine binding protein YTHDF2. Mol Cancer. 2021 Mar 3;20(1):45.
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