ATGScript® RT Mix for qPCR (+gDNA wiper) 逆转录预混液(耐72℃高温、含基因组去除，适用于下游qPCR)
价格： ￥760
产品详情
文献和实验
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库存 ：充足
保质期 ：一年
供应商 ：南京巨匠生物科技有限公司
保存条件 ：-20℃
规格 ：100 rxns
产品简介
ATGScript® Reverse Transcriptase 是在 M-MLV (H- ) Reverse Transcriptase 基础上经过饱和定点突变得到的全新逆转录酶。经过热点突变，ATGScript® Reverse Transcriptase 的错配率比 M-MLV (H- ) Reverse Transcriptase 大幅降低，提高了克隆的保真度和热稳定性。通过优势组合突变增强了其与模板的亲和力，特别适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。ATGScript® RT mix for qPCR (+gDNA wiper)适用于两步法 qRT-PCR 检测，加入模板 RNA 和水即可迅速反应。产品中的 4 × gDNA wiper Mix 可彻底去除残留的基因组 DNA 污染，保证后续定量结果更加可靠；5 × ATGScript® RT Mix 中含有逆转录反应所需的所有组分，同时终止 gDNA wiper 作用，保证 cDNA 的完整性。本产品针对 qPCR 进行特别优化，比例优化的 Random primers/Oligo dT primer mix，使 cDNA 合成可从 RNA 转录本的各个区域起始并具有相同的逆转录效率，大程度保证了qPCR 结果的真实性和可重复性。逆转录产物兼容 SYBR® Green 和探针法 qPCR，可以根据实验目的，选择相应的试剂配合使用，进行高性能的基因表达分析。
产品组成
| 组分 | R113 ( 100 rxns ) ( 20 μl/rxn ) |
| RNase free ddH2O | 2 × 1 ml |
| 5 × ATGScript® RT Mix | 400 μl |
| 5 × Control No RT Mix | 40 μl |
| 4 × gDNA wiper Mix | 400 μl |
*1. 包含 ATGScript® Reverse Transcriptase、dNTP、RNasin、Random primers/Oligo dT primer mix。
*2. 除不含 ATGScript® Reverse Transcriptase 外，其余成分与 5 × ATGScript® RT Mix 相同。
储存条件
-20℃保存，于-20 ~ 0℃运输。▲避免反复冻融。
质量控制
核酸外切酶残留检测：
20 U 本品和 0.6 μg λ-HindIII 在 74℃下孵育 1 h，DNA 的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：
20 μl 反应体系，10 U 本品和 1 μg λDNA，37℃温育 4 h，DNA 的电泳谱带无变化。
RNase 残留检测：
20 U 本品和 1 μg Hela 细胞总 RNA 在 37℃下孵育 30 min，RNA 的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留 DNA 残留检测：
大肠杆菌残留 DNA 残留检测：
50 μl 体系中，以 ddH2O 为模板，扩增 E. coli 16 s rDNA 基因。30 个循环后进行 1%琼脂糖凝胶电泳，染色，无扩增条带。
功能检测：
以 1 μg 总 RNA 为模板，Oligo (dT)23VN 为引物，42℃反应 45 min。取 1/10 cDNA 产物进行 PCR 扩增 VIN 基因。琼脂糖凝胶电泳，EB 染色，可见有单一的 4.6 kb 条带。
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