ATGScript® 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper) cDNA第一链合成试剂盒(含基因组去除)
价格： ￥800
产品详情
文献和实验
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库存 ：充足
保质期 ：一年
供应商 ：南京巨匠生物科技有限公司
保存条件 ：-20℃
规格 ：100 rxns
产品简介
ATGScript® Reverse Transcriptase 是在 M-MLV (H- ) Reverse Transcriptase 基础上经过饱和定点突变得到的全新逆转录酶。经过热点突变，ATGScript® Reverse Transcriptase 具有更高的热稳定性，使其可用于具有二级结构或 GC 含量较高的 RNA 模板的逆转录，并可获得更多全长的 cDNA。并且 ATGScript® Reverse Transcriptase 的错配率比 M-MLV (H- ) Reverse Transcriptase 大幅降低，提高了克隆的保真度。通过优势组合突变增强了其与模板的亲和力，特别适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。
ATGScript® 第一链 cDNA 合成试剂盒基于 ATGScript® Reverse Transcriptase，包含合成高质量第一链 cDNA 所需的所有成分，适合于后续的 PCR、qPCR 以及 PCR 克隆。产品中的 4 × gDNA wiper Mix 可彻底去除残留的基因组 DNA 污染，保证后续定量结果更加可靠；5 × ATGScript® RT Mix 包含优化的缓冲体系和 dNTP；Enzyme Mix 包含 ATGScript® Reverse Transcriptase 和 RNasin。可根据需要，选择 Oligo (dT)23VN、Random hexamers 或基因特异引物作为逆转录引物。
产品组成
| 组分 | R112 ( 100 rxns ) ( 20 μl/rxn ) |
| RNase-free ddH2O | 2 × 1 ml |
| 5 × ATGScript® RT Mix | 400 μl |
| ATGScript® Enzyme Mix | 200 μl |
| Oligo (dT)23VN (50 μM) | 100 μl |
| Random hexamers (50 ng/μl) | 100 μl |
| 4 × gDNA wiper Mix | 300 μl |
*1. 包含 1 mM each dNTP
*2. 包含 RNasin (ATG #RR101)、耐高温逆转录酶 ATGScript® Reverse Transcriptase
储存条件
-20℃保存，于-20 ~ 0℃运输。▲避免反复冻融。
质量控制
质量控制
核酸外切酶残留检测：
20 U 本品和 0.6 μg λ-HindIII 在 74℃下孵育 1 h，DNA 的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：
20 μl 反应体系，10 U 本品和 1 μg λDNA，37℃温育 4 h，DNA 的电泳谱带无变化。
RNase 残留检测：
20 U 本品和 1 μg Hela 细胞总 RNA 在 37℃下孵育 30 min，RNA 的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留 DNA 残留检测：
50 μl 体系中，以 ddH2O 为模板，扩增 E. coli 16 s rDNA 基因。30 个循环后进行 1%琼脂糖凝胶电泳，染色，无扩增条带。
功能检测：
以 1 μg 总 RNA 为模板，Oligo (dT)23VN 为引物，42℃反应 45 min。取 1/10 cDNA 产物进行 PCR 扩增 VIN 基因。琼脂糖凝胶电泳，EB 染色，可见有单一的 4.6 kb 条带。
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