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提供商 :浙江亦高生物科技有限公司
服务名称 :富尔根染色
富尔根染色富尔根(Feulgen)反应是显示DNA的传统方法,切片先用稀盐酸处理,DNA经弱酸(1mol/L HCL)水解 后,
在60°C条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开,脱氧核糖的一端释放出醛基,并在原位 与
Schiff试剂反应生成紫红色产物。
原理同PAS反应,使细胞核DNA显紫红色。在此过程中RNA不受影响,故染色具有DNA特异性。准确的温
度和盐酸浓度,适宜的水解时间是成功的关键。水解过度或不足均降低染色强度。
配制试剂:
1.1mol/L HCL:将8.5ml浓盐酸和91.5ml蒸馏水混合即得;
2.0.5%亮绿水溶液;
染色步骤:
1.取培养于盖玻片上的贴壁原代细胞,用Hanks液漂洗三次;
2.在卡诺(Carnoy)固定液中固定10min,然后蒸馏水洗三次;
3.移入60°℃浓度为1mol/L的HCL中静置10min;
4.用蒸馏水漂洗几次;
5.放入Schiff试剂中静置30-60min,可随时检查显色情况;
6.用自来水冲洗5min;
7.再用蒸馏水漂洗;
8.不同浓度梯度乙醇溶液脱水;
9.用二甲苯透明,树胶封片;
结果:
原代细胞核内DNA显紫红色,细胞质呈绿色。
结果展示:
浙江亦高生物科技有限公司
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