中杉金桥 ISH-7001 EBER检测试剂盒（原位杂交法）

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中杉金桥  ISH-7001  EBER检测试剂盒（原位杂交法），产品简介：
产品品牌：中杉金桥
产品货号：ISH-7001
产品名称：EBER检测试剂盒（原位杂交法）
产品规格：50测试/盒
中杉金桥  ISH-7001  EBER检测试剂盒（原位杂交法），产品说明：


分类： 分子病理
子分类：   原位杂交（ di gao xin 标记）
规格： 50测试/盒，100测试/盒，300测试/盒
检验方法：      1、 检验所需仪器、设备：移液器、恒温箱、杂交仪、计时器、孵育盒、染色架、盖玻片、光学显微镜、洗瓶。
2、 试剂准备：
a) DAB显色液需要在使用前配制。配制方法：在小试管中按 20 倍稀释比例依次加入 DAB 底物缓冲液及 DAB 浓缩显色液（棕褐色液体）混匀。配置好的 DAB 显色液 2～8℃避光存放，24小时内有效。
b) PBS 缓冲液需要先配制成溶液，再加入 0.01%体积的 Tween-20（1L 约加入2～3滴）。
3、 操作程序
a) 脱蜡
石蜡切片置于新鲜脱蜡液中，浸泡10分钟×3 次；去除多余的液体后，置于无水乙醇中，浸泡3分钟×3次；经空气干燥5～10分钟。
b) 封闭
空气干燥后的组织，根据大小，滴加 80~100uL封闭液，室温避光孵育10分钟，纯水洗去封闭液后，梯度乙醇脱水（75%，95%。100%各2分钟），空气干燥。
c) 酶处理
空气干燥后的组织，根据大小，滴加 80～100uL胃酶工作液，37℃孵育，根据不同组织类型及切片厚度调整孵育时间5～30分钟。弃去胃酶工作液后，梯度乙醇脱水（75%，95%，100%各2分钟），空气干燥。
d) 滴加探针或空白对照试剂
根据组织大小，组织上滴加5～10uL di gao xin 标记的EBER探针或空白对照试剂，加硅化盖玻片，橡胶水泥封边。37℃杂交孵育2～4小时或过夜（原位杂交仪内或湿盒内）。
e) 去除杂交盖玻片
小心去除橡胶水泥，将玻片浸入PBS缓冲液内10分钟，盖玻片自然滑落（期间提拉玻片数次促进盖玻片滑落）。阻水笔画圈。PBS缓冲液冲洗2分钟×3次。
f) 滴加HRP标记抗 di gao xin 抗体
根据组织大小，滴加30～50uL HRP标记抗 di gao xin 抗体，37℃孵育30分钟；PBS缓冲液冲洗2分钟×3次。
g) DAB显色
根据组织大小，加入适量新鲜配制的DAB显色液，室温孵育5～10分钟，注意镜下观察显色情况。
h) 复染
自来水冲洗，苏木素染色液复染5～10秒；分化、冲洗返蓝。
i) 脱水、透明、封片。
j) 阅片，阳性染色定位于细胞核。
4、 结果判定，染色结果须由有资质的病理医生对染色后的组织片在光学显微镜下观察并进行判读。
预期用途： 用于原位杂交细胞组织上的核酸靶点的检测。

产品订购信息：
ISH-7001  中杉金桥  EBER检测试剂盒（原位杂交法）  50测试/盒