文献:Molecules 2022, 27, 6927
DOI: 10.3390/molecules27206927
活细胞成像实验:在37℃的CO2/空气(5%/95%)恒温培养箱中,使用含有10%胎牛血清的MEM培养基中培养HeLa细胞。
将细胞接种于合适的容器中(如共聚焦专用皿,玻璃底96孔板)中,培养过夜。
在37℃,用含0.5 μM探针(QUID-2)的FluoroBrite DMEM培养基染色20分钟,用培养基洗去多余的探针。
最后在激光扫描共聚焦显微镜中/荧光显微镜对样品进行成像。
探针(QUID-2)在488 nm激发下,荧光收集范围500-600 nm,观察RNA。
固定成像实验:
在37℃的CO2/空气(5%/95%)恒温培养箱中,使用含有10%胎牛血清的MEM培养基中培养HeLa细胞。
将细胞接种于合适的容器中(如共聚焦专用皿,玻璃底96孔板)中,培养过夜。
用含4%
(CH2O)n的DEPC-PBS缓冲液中固定细胞,室温下固定15分钟。用PBS缓冲液冲洗数遍。
用0.5 μM探针(QUID-2)在37℃下染色15分钟,用PBS洗去多余的探针。
最后在激光扫描共聚焦显微镜中/荧光显微镜对样品进行成像。
探针(QUID-2)在488 nm激发下,荧光收集范围500-600 nm,观察RNA。