文献支持酵母菌落PCR试剂盒/快速扩增酵母阳性克隆试剂盒

库存 ：999

保质期 ：-20 ℃保存，有效期1年

供应商 ：南京瑞源生物

保存条件 ：-20 ℃保存

规格 ：80T/320T

▼ 产品简介

本试剂盒含有绿色染料，可在反应结束后直接进行电泳，能够快速扩增酵母中重组质粒目的基因片段，省时省力。Yeast lysis buffer用于破坏酵母的细胞壁；2×Yeast PCR mix含PCR buffer，dNTPs，MgCl2，热启动快速Taq酶，客户只需加入引物和模板/酵母菌落即可进行扩增，减少移液操作，提高了稳定性，且2×Yeast PCR mix中含有保护剂，反复冻融后仍可保持稳定性。PCR产物的3’端带有A，可直接用于TA克隆。

 

▼ 产品规格

产品编号：RY8001

规格：80T / 320T

 

▼ 保存条件

-20 ℃保存，有效期1年

 

▼ 产品组分

组成成分	单位及状态	规格
Yeast lysis buffer	0.4ml/支，液体	0.4ml
2×Yeast PCR mix	1ml/支，液体	1ml
说明书	份，纸质版

▼ 产品优势

 

▼ 实验指南

1、吸取3-3.5 μl Yeast lysis buffer到PCR管中，用无菌枪头或牙签蘸取适量酵母菌至PCR管中。

2、吸打（搅拌）混匀后，置于98 ℃反应10-20 min。

3、再准备一支无菌PCR管，按下表配制反应体系。

 

PCR反应体系：

2×Yeast PCR mix	25 μl
primer F（10 μM）	2 μl
primer R（10 μM）	2 μl
template*	1 μl
ddH2O	to 50 μl

* 步骤2的反应液短暂离心,混匀后吸取1 μl作为模板，为最佳

 

PCR反应条件：

反应温度 95 ℃	反应时间	循环
95 ℃	3 min	1
95 ℃	15 sec	30-32
Tm	15 sec	30-32
72 ℃	15 sec /kb	30-32
72 ℃	5 min	1
4 ℃	∞	1

* 该退火温度根据引物的Tm值进行调整，一般设置Tm -5 ℃
 

▼ 案例展示

酵母菌株案例：

图注：从SD/-Leu-Trp-His-Ade培养基中挑取酵母菌落直接进行酵母菌落PCR

 

枯草芽孢杆菌案例：

图注：枯草芽孢杆菌是一款革兰氏阳性菌，通常需要提取DNA后进行扩增，客户用我们的试剂一步直接扩增

 

 

生防菌案例：

      
 

图注：扩增各种真菌，以ITS为引物，效果是显著的，阳性扩增率100%