文献支持酵母分泌表达系统（分泌表达/毕赤酵母中的表达与纯化/重组酵母表达质粒构建）

▼ 服务简介

酵母具有与其他真核生物类似的蛋白质分泌途径，外源基因的分泌表达, 不仅方便了表达产物的分离纯化, 同时也和表达产物的翻译后加工有关, 很有意义。
酵母表达系统是研究真核蛋白质表达和分析的有力工具，瑞源生物的酵母分泌表达系统采用的宿主是巴氏毕赤酵母（Pichia pastoris），该表达系统是近年来发展迅速、应用广泛的一种真核表达系统

▼ 技术原理
巴氏毕赤酵母（Pichia pastoris）是甲醇营养型酵母菌，有两个乙醇氧化酶（Alcohol oxidase, AOX）编码基因AOX1和AOX2，两种序列相似，AOX1基因严格受甲醇诱导和调控。当甲醇为唯一碳源时，AOX1启动子可被甲醇诱导，启动乙醇氧化酶的表达，从而用甲醇进行代谢，含AOX1启动子的质粒可用来促进编码外源蛋白的目的基因的表达。

 

▼ 酵母分泌表达系统的优势

1、含有特有的强有力的AOX（醇氧化酶基因）启动子，用甲醇可严格地调控外源基因的表达。
2、培养成本低，产物易分离，毕赤酵母所用发酵培养基成本合理，一般碳源为甘油或葡萄糖及甲醇，其余为无机盐，培养基中不含蛋白，有利于下游产品分离纯化。
3、外源蛋白基因遗传稳定，外源基因能以高拷贝数整合到毕赤酵母基因组中，不易丢失并能得到高表达菌株。
4、作为真核表达系统，毕赤酵母具有真核生物的亚细胞结构，具有糖基化、脂肪酰化、蛋白磷酸化等翻译后修饰加工功能。
 

▼ 瑞源生物服务优势

1、具备完备的毕赤酵母表达平台，可以根据蛋白特性或客户的需求设计不同的实验方案；
2、具有高通量的筛选平台，可以快速有效的得到最佳表达条件；
3、具有大规模发酵生产能力。
 

▼ 服务内容

瑞源生物科研人员建立了成熟的酵母表达纯化服务平台，提供优质的重组蛋白在毕赤酵母中的表达与纯化服务。
酵母分泌表达系统服务项目：
1、重组酵母表达质粒构建；
2、重组质粒电转化；
3、重组表达子筛选；
4、小规模蛋白表达和纯化（2L培养基培养产物）。