抗体配对-ELISA定制开发

提供商 ：卡梅德生物科技（天津）有限公司

服务名称 ：抗体配对-ELISA定制开发

       卡梅德生物（KMD Bioscience）多年来致力于抗体定制研究。抗体配对是在抗体的基础上，对抗体进一步的开发应用，通过抗原抗体特异性结合以及同种抗原不同位点抗体的配对，寻找到能够适用于商品化试剂盒开发的特殊配对抗体。我们拥有经验丰富的研发团队和完善的抗体平台建设，除了能进行抗体定制服务外，也能够为客户提供基于GMP指导规则的项目特异性的抗体筛选与配对服务。
        ELISA试剂盒开发是在抗体配对成功的基础上，对抗体更进一步的商品化产品的研发和生产服务。卡梅德生物搭建了完善的ELISA试剂盒、荧光免疫层析开发平台，我们的研发技术人员积累了丰富的ELISA试剂盒开发经验，结合成熟的抗原、抗体研发系统，可提供优质可靠的抗体配对定制服务，以及开发相应的ELISA试剂盒。我们能够针对特定检测源，制备特异性抗原抗体，根据应用需要量身定制检测试剂盒，有效控制检测试剂成本的同时，达到多个水平不同的检测需求。

抗体配对服务:

        配对抗体是指可以同时结合在一个抗原分子的不同抗原决定簇的两个抗体。通常情况下，一个抗原分子拥有多个抗原决定簇，将抗原注射入动物体内进行免疫，针对不同的抗原决定簇会产生不同的抗体。产生的单克隆抗体具有特异性与专一性，即一个抗体分子只会特异性地结合一个抗原决定簇。抗体配对是通过抗原抗体特异性结合特性，使两个针对不同抗原决定簇的抗体，有可能同时结合到抗原分子上，这两个抗体就是配对抗体。
       配对抗体多用于ELISA-双抗体夹心法对目的蛋白进行定量和检测。一对配对抗体对包括捕获抗体和生物素标记的检测抗体。化学发光和免疫层析等技术，都离不开高质量的抗体对，其在蛋白质定量中有着广泛的应用。
      卡梅德生物有着完整的上下游配套服务，能够提供从抗原合成、抗体制备、抗体配对到ELISA试剂盒开发的一站式技术服务，我们保证足量的免疫数量，配对成功率高。

ELISA酶联免疫试剂盒开发:

       ELISA (酶联免疫吸附反应) 是一种基于固相载体的中高通量筛选技术，被广泛应用于定性，定量检测样品中多肽，蛋白，抗体的含量。在ELISA实验中，抗体或者抗原需提前预结合到酶标板（96孔板）中，再利用辣根过氧化物酶（HRP），碱性磷脂酶（AP）或者其他化学发光基团标记的抗体或者抗原进行显色反应。 如图1所示，ELISA方法主要包括：ELISA夹心法（主要用于测定抗原）、直接法，间接法（主要用于测定抗体）或竞争法（测定小分子化合物）。
 
 
图1 ELISA方法分类
 
      ELISA酶联免疫试剂盒的开发工作主要涉及到抗体配对的筛选、试剂盒体系调试优化、试剂盒评估及稳定性调试等实验，最终开发出相应的试剂盒。抗体的性能好坏，识别位点的差异性直接决定了后期ELISA试剂盒的质量好坏。抗体配对成功后，需要验证的工作包括试剂盒的检测灵敏度，线性范围，重复性，特异性和热稳定性。
服务内容及产品：
 

*项目评估与实验方案设计

*抗体的质量评价：抗体浓度（BCA法或Lowery法测定），抗体效价（需客户提供抗原）

*抗体配对方阵筛选报告（含N/P值）

*检测灵敏度验证报告

*线性范围验证报告        *重复性验证报告

*特异性报告     *热稳定性（37 ℃或25 ℃热稳定性）报告

*成型试剂盒及批间一致性数据

 
服务流程：
 

 
服务优势：
 
--拥有庞大的产品库，具备多种优质ELISA应用抗体和ELISA检测试剂盒
--通过筛选多个细胞阳性克隆株，提供单抗-多抗，单抗-单抗不同需求的配对筛选，达到不同多个水平的的检测需求
--技能娴熟的研发技术人员，拥有丰富的试剂盒开发经验，恪守ELISA试剂盒开发的八大质控原则，通过后期的配对优化、评估及稳定性调试，为提供高品质的产品保驾护航
--拥有成熟的单克隆抗体技术平台，保证免疫数量，提高抗体配对成功率
--提供齐全的检测报告及成品试剂盒，包括真实、全套的检测数据
--完整的上下游服务：能够提供从抗原合成、抗体制备、抗体配对、抗体修饰到ELISA试剂盒开发等一站式技术服务

公司介绍：
卡梅德生物科技（天津）有限公司作为国家高新技术企业，专注于为全球科学家和研究机构提供天然蛋白提取与发酵、重组蛋白定制表达服务，单、多克隆抗体开发，噬菌体文库构建与筛选服务；同时，基于我公司成熟的五大核心技术服务平台，成功研发了众多用于科学研究的重组蛋白、抗体、抗体药物靶点蛋白、工业酶、诊断原料等相关试剂。

核心平台：

---噬菌体抗体展示技术平台

卡梅德生物科技有限公司利用自有的噬菌体（M13，T7噬菌体）展示技术平台，能够为客户提供高性价比的重组VHH抗体（纳米抗体/驼类纳米抗体）制备方案，包括动物免疫，文库建立，文库筛选以及重组抗体的体外表达等。
 

---抗体工程技术平台

卡梅德生物科技的抗体工程平台包含单克隆抗体制备服务平台，多克隆抗体制备服务平台，抗体测序与改造平台。 单克隆抗体制备平台：基于杂交瘤技术的小鼠单抗技术平台，能够在2-3个月获得高亲和力与高特异性的单克隆抗体，同时基于噬菌体展示技术，我司能够制备多物种的重组单克隆抗体，包括小鼠，兔子，骆驼，羊驼以及人单抗。

多克隆抗体制备服务平台：能够为客户提供兔多抗，羊多抗，骆驼类多抗，牛多抗等多物种的抗体制备服务，根据不同的抗原类型，来自卡梅德生物的抗体专家会为您量身定做适合您需求的方案，以满足您的项目要求并节省您的宝贵时间。

抗体一级序列测序平台：为满足大量客户对抗体基因序列与氨基酸序列信息的需求，我们为客户提供De Novo抗体全长氨基酸序列解析和N端测序服务；同时我们设计积累多达80种杂交瘤抗体基因测序引物。

抗体改造技术平台：卡梅德生物技术的抗体改造平台包括嵌合抗体制备，抗体亲和力成熟以及抗体人源化服务。目前我们已经成功制备十几例嵌合抗体与人源化抗体，均成功交付。

 

---蛋白表达与纯化服务技术平台

卡梅德生物科技目前拥有四大蛋白表达平台，能为客户提供优质的蛋白表达技术服务。

哺乳动物表达平台： 目前公司拥有Freestyle CHO，Expi CHO，CHO-DG44，HEK293F，Vero等细胞系用于蛋白表达制备。公司秉承质量优先原则，全部统一采用Gibco细胞培养基和相关转染配套试剂，以保证每个批次的哺乳动物细胞蛋白表达产品高质量、高表达水平的交付。同时公司拥有的表达载体体系，相比市面常用蛋白表达载体，能够为客户提供更高纯度的蛋白。

昆虫细胞表达平台：目前公司常采用的昆虫表达细胞为SF9，配套使用的是来自Gibco的培养基，只为更快、更好地为客户提供高质量的产品。利用该蛋白表达平台，我们已经成功制备了多种人源跨膜蛋白，包括多种GPCR家族成员蛋白。

原核蛋白表达平台：大肠杆菌（E.coli）重组蛋白表达技术经过多年的发展，已经积累了很多的经验。但如果要在大肠杆菌表达体系获得不错的可溶以及高产量的蛋白表达，一个全方位设计的表达策略必不可少。卡梅德生物科技的专家团队在蛋白表达和抗体制备方面具有丰富的经验和知识储备，针对每位客户的需求，我们的都会提供具体的方案设计。

酵母蛋白表达平台：毕赤酵母，酿酒酵母等蛋白表达体系，适用于需要真核表达蛋白，同时兼具产量与性价比的项目需求特点。

植物表达平台：为了提供更好的服务，卡梅德生物携手国内重点科研单位共同为客户提供基因烟草瞬时转染技术的植物蛋白表达服务，项目从设计构建到蛋白表达只需要4-6周。该技术平台能够为客户在较短的时间内获得高纯度，高质量的植物来源的蛋白，已解决大部分植物蛋白在上述几大蛋白表达系统中不溶或不表达的难题。

---蛋白批量发酵平台

超高密度发酵技术：卡梅德生物科技能够为客户提供5L，10L,30L，80L体积的贴壁细胞高密度发酵技术服务（微载体贴壁培养技术），人源细胞贴壁细胞培养密度高达4x106个/ml，适用于病毒转染类型的蛋白高产量表达发酵，能够做到1g/L发酵水平。利用该技术平台，我们目前完成的重组抗体发酵表达记录高达4.7g/L发酵水平。

同时，借助有氧发酵技术，我们能够为客户提供原核和酵母的超高密度发酵服务，采用有氧发酵类型的原核发酵技术，蛋白产量比传统的原核发酵要高（相差接近100倍蛋白产量和得率）。

---蛋白纯化技术平台：

我司分别配制了Akta和BioRad Biological的蛋白纯化仪，同时拥有GE全套填料，包括Sphedax 75/200,500, G25,G100，CMFF,Q-FF，DEAE以及不同规格的预装柱等，能够在1-2周内为客户完成一套蛋白纯化的工艺开发小试方案。我司的科研团队成员均来自国内生物制药企业，硕士博士学历占比98%，因此有能力为客户提供快速，高质量天然蛋白和跨膜蛋白的纯化等优质服务。

 

---稳定细胞系筛选平台与基础分子生物平台

稳定细胞系构建平台：卡梅德生物可为客户定制不同类型的稳定细胞系构建与筛选服务，如利用Crisper/Cas9的多物种、多细胞系来源的细胞沉默，敲除，过表达等稳定细胞系；同时我们也为客户提供基于电转或脂质体转染（Lipofectin2000/3000）的稳定转染细胞系构建服务，如CHO细胞蛋白高表达细胞株等。

卡梅德生物的基础分子生物学平台承担了包括基因克隆，蛋白定量，免疫印迹检测（SDS-PAGE、WB），宿主核酸检测，蛋白抗体亲和纯化，ELISA操作，内毒素检测，HPLC分析，免疫组化，IP，免疫浊度，流式细胞术等服务。