产品详情
文献和实验
相关推荐
保存条件 ：2-8℃ 避光
规格 ：10ml/瓶
XP磁珠
产品简介
本产品（简称XP磁珠）可用于筛分特定尺寸范围内的DNA片段或纯化DNA产物，通 过向核酸溶液中加入不同体积的XP磁珠，可选择性回收不同大小的DNA片段，适用于纯化引物二聚体严重的DNA产物或为第二代测序（NGS）制备DNA文库。可同时满足手工或自动化工作平台的操作需求，得到的DNA纯度高可满足下游应用需求。
产品特性
产品特性
|
水中DNA纯化收率（2.0x）
|
＞80%
|
|
储存条件及有效期
|
2-8℃ 避光可保存 18 个月 (避免冷冻！)
|
|
预期用途
|
适用于DNA产物纯化或特定区间长度的DNA片段分选
|
样本要求
➢ 样品应为片段化的双链DNA。
➢ 样品应溶于超纯水或TE缓冲液。
➢ 进行DNA片段分选或纯化时，初始样品体积应不少于50 µL，体积不足时请用超 纯水补齐至50uL。样品体积太少将增大移液误差进而影响分选精度。
➢ DNA样品尺寸建议控制在150 - 2000 bp范围内。
实验方法
（一）一步法分选【适用于DNA产物纯化】
表1 XP磁珠纯化DNA片段推荐比例
实验方法
（一）一步法分选【适用于DNA产物纯化】
表1 XP磁珠纯化DNA片段推荐比例
|
XP磁珠加入的体积比
|
吸附的DNA片段长度
|
|
0.5x
|
>600bp
|
|
0.55x
|
>500bp
|
|
0.6x
|
>400bp
|
|
0.7x
|
>300bp
|
|
0.8x
|
>200bp
|
|
1.0x
|
>100bp
|
注：实际分选效果与实验人员操作精度有关，初次实验可依据实际样品进行初步条件摸索。
1) 涡旋振荡XP磁珠，使磁珠充分混匀。
2) 转移DNA溶液至1.5 mL离心管中。
3) 参照表1，向DNA溶液中添加所需体积的XP磁珠，移液器吹打混匀后室温 静置孵育5min。
注：样品体积*体积比=磁珠体积，例如：100µL样品*0.8x比例=80µL XP磁珠
4) 把样品管转至磁力架上，静置磁吸10min，小心吸弃上清液。
5) 保持离心管紧贴磁力架，向离心管中加入 500µL 80%乙醇。
6) 孵育30s后小心吸弃上清液。
7) 重复步骤5)-6)一次。
8) 开盖干燥磁珠至表面无明显液体光泽（约5-10min，若磁珠未干可适当延时）。
注：请勿将磁珠长时间干燥，干燥过度将影响洗脱收率。
9) 从磁力架上取下样品管，加入不少于20µL的超纯水或TE缓冲液。
10) 使用移液器吸取管内溶液，将附着在管壁上的固体磁珠轻轻吹打10次，使其充分 溶解均匀。（或使用旋涡混匀仪使磁珠震荡混匀1min）
11) 将离心管室温静置5min，使磁珠表面吸附的DNA被充分洗脱。
12) 将离心管转至磁力架上，静置磁吸5min使管内溶液完全澄清。
13) 将管内上清液 (含目的DNA片段) 转移至新的离心管中，-20℃保存。
（二）两步法分选【适用筛分特定尺寸的DNA片段】
表2 XP 磁珠文库分选推荐比例
|
筛选片段平均大小
|
300bp |
400bp
|
500bp
|
600bp
|
700bp
|
|
第一轮体积比
（XP磁珠:DNA）
|
0.80x
|
400bp |
0.6x
|
0.55x
|
0.50x
|
|
第二轮体积比
（XP磁珠:DNA）
|
0.2x
|
0.2x
|
0.2x
|
0.15x
|
0.15x
|
1) 涡旋振荡XP磁珠，使磁珠充分混匀。
2) 转移 A µL DNA溶液至1.5 mL离心管中。
3) 根据待构建文库DNA片段大小，参照表2推荐的第一轮分选体积比进行第一轮DNA分选【本轮分选保留上清弃磁珠，目的是去除大片段DNA】。例如向离心管中加入 0.7*A µL的XP磁珠至离心中。
4) 将离心管中液体用移液枪吹打混匀10次，室温静置孵育5min。
5) 将离心管转至磁力架上，静置磁吸5min。
6) 小心将管内上清液转至新的离心管中。
7) 向新离心管（含上清液的）加入0.2*A µL XP 磁珠进行第二轮分选【本轮分选保 留磁珠弃上清，目的是结合中间片段DNA，去除较小片段DNA】，移液器吹打
混匀10次，室温静置孵育5min。
8) 将离心管转移至磁力架上，静置磁吸5min，小心吸弃上清液。
9) 保持离心管紧贴磁力架，向离心管中加入 500µL 80%乙醇。
10) 孵育30s后小心吸弃上清液。
11) 重复步骤9)-10)一次。
12) 开盖干燥磁珠至表面无明显液体光泽（约5-10 min，若磁珠未干可适当延时）。
注：请勿将磁珠长时间干燥，干燥过度将影响纯化收率。
13) 从磁力架上取下样品管，加入不少于20 µL的超纯水或TE缓冲溶液。
14) 使用10uL移液器吸取管内溶液，将附着在管壁上的固体磁珠轻轻吹打10次，使其 充分溶解均匀。（或使用旋涡混匀仪使磁珠震荡混匀1min）
15) 将离心管室温静置5min，使磁珠表面吸附的DNA被充分洗脱。
16) 将离心管转至磁力架上，静置磁吸5min使管内溶液完全澄清。
17) 将管内上清液 (含分选DNA片段) 转移至新的离心管中，-20℃保存。
【注意事项】
磁珠保存于4℃，使用前需室温平衡至少30min，需震荡混匀直至底部无固体沉淀方可取液。
试剂盒中所有组分均需在效期内使用。
使用无 DNA/RNA 酶的离心管和吸头。
80%乙醇需现配现用，否则将影响产物收率。
广州奕昕生物科技有限公司
未合作商家
