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文献和实验
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库存 :27
保质期 :12个月
供应商 : 上海邦景
保存条件 :2-8℃
规格 :50T
商品属性:产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
5min极速病毒RNA提取试剂盒 | BJ-PJ6628 | 50T | 936 |
描述:
本试剂盒采用独特的裂解液,可快速可靠的从病毒液样本中纯化出高纯度的总 RNA。该试剂盒是目前国际上操作步骤最少、用时最短的病毒 RNA 提取试剂盒(仅需要 5 分钟)。应用本试剂盒提取的 RNA 可直接用于反转录、基因克隆、定量 PCR 检测等多种分子生物学实验。
注意事项:
(1) 本试剂盒中的 Washing Buffer 中已经加乙醇,无需单独添加。
(2) RNA LB1 和 RNA BB2 均具有腐蚀性,注意防护。
操作方法
(1)裂解/上柱(1.5ml EP 管中处理)
液体样本:血清、血浆、唾液、痰液、尿液、细胞培养病毒上清液等液体样本直接吸取 150 μl 到 1.5ml EP 管中,并加入 120 μl RNALB1,漩涡混合均匀 10 秒。打开 1.5ml EP 管盖,并加入 500 μl RNABB2 中,漩涡混合均匀 10 秒。倒入吸附柱中,13000 rpm 离心 30秒,倒掉过柱后的废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
抗凝全血:直接吸取 150 μl 到 1.5 ml EP 管中,并加入 120 μl RNA
LB1,漩涡混合均匀 10 秒。打开 1.5 ml EP 管盖,并加入 500 μl RNA
BB2 中,漩涡混合均匀 10 秒。13000 rpm 离心 30 秒后,将上清液倒入吸附柱中,13000 rpm 离心 30 秒,倒掉过柱后的废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
固体样本:组织、粪便等样本。取 10~100 mg 固体材料样本,加入到 300 μl RNA LB1 中(1.5ml EP 管),并加入几粒钢珠(一般3~4 粒),置于组织研磨仪中,研磨 1 分钟。研磨完毕后,打开管
盖,向匀浆液中加入 750 μl RNA BB2,并 13000 rpm 离心 1 分钟。
打开管盖,用 1 ml 吸头吸取 750 μl 上清液到吸附柱中。13000 rpm离心 30 秒,倒掉过柱废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
(2) 洗涤和洗脱
上述裂解/上柱操作完毕后,向吸附柱中加入 500 μl WashingBuffer,13000 rpm 离心 15 秒,并倒掉过柱废液。重复此洗涤步骤一次。 将吸附柱重新放回离心机,13000 rpm 空离心 1min,将残留的乙醇彻底甩干。 将吸附柱芯放入到 1.5 mL Nuclease Free收集管中,向吸附柱芯中加入 20~50 μl Nuclease Free H2O,室温放置1 min,13,000rpm离心 1min,洗脱液即为提取的病毒RNA,冷冻保存。
特别说明:
(1)RNA LB1 和 RNA BB2 含有高盐,在样本加入到此溶液后,病毒会迅速灭活。同时此溶液对皮肤有腐蚀性,务必做好防护,如接触到皮肤,用大量清水冲洗。
(2)样本处理过程中的吸头等材料可能含有病毒分子,实验完毕后务必妥善处理,不能随意丢弃。
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