产品详情
文献和实验
相关推荐
注册证号 :/
英文名 :/
CAS号 :/
库存 :现货库存
供应商 :南京万木春
肿瘤类型 :/
细胞类型 :原代细胞
ATCC Number :/
品系 :/
组织来源 :/
相关疾病 :/
物种来源 :/
免疫类型 :/
细胞形态 :/
是否是肿瘤细胞 :否
器官来源 :/
运输方式 :常温/干冰
年限 :/
生长状态 :/
规格 :5×10^5/T25方瓶
一、小鼠支气管上皮细胞简介
呼吸道上皮细胞是由纤毛、无纤毛和能分泌黏液的细胞按照从近端到远端呼吸道分布的混合细胞群组成。这类细胞的各个亚型细胞各具特点,从而不仅能形成物理屏障,可有效的防止多种有毒物质,而且通过产生和分泌大量化学介质和细胞因子形成高度复杂的宿主防御系统。支气管上皮由表面的上皮细胞和粘液腺体组成。表面的上皮细胞由基细胞,杯状细胞和纤毛细胞三种细胞构成,形成了基底柱状结构,并能清除粘液纤毛。用支气管上皮细胞培养分化诱导纤毛表型的研究显示,IL-4和IL-13的刺激能改变增殖、纤毛运动、黏液分泌等一系列细胞功能。支气管上皮细胞增殖以及其它细胞过程也部分受到EGF受体信号的调节。支气管上皮细胞的培养为我们研究这类细胞的功能和病理生理机制提供了一个体外模型。本公司生产的小鼠支气管上皮细胞采用酶解法制备而来,细胞总量约为5×105/T25方瓶,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
二、 使用方法
1 、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出 T25 方瓶, 75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中静置 2-3 小时, 以稳定细胞状态,然后打开瓶子回收瓶子中培养液作为后续培养此细胞的完全培养液(备注: 先使用瓶子中完全培养液培养及尽快冻存保种细胞, 保存种子后再尝试自己完全培养液培养观察是否适合此细胞生长,以免使用自己培养液不适合细胞生长造成细胞状态不好或死亡) ,最后按照后面细胞传代步骤进行细胞传代培养。
2 、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时,弃 T25 方瓶中的培养液, 用 PBS 清洗细胞 3 次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟,倒置显微镜下观察,待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化,用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm/min,离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 10ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代, 最后放入 37℃ ,5%CO2 细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后, 观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3 、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 90%面积时,弃 T25 方瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞 3 次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 2ml 至培养瓶中 37 度培养箱放置 3-5 分钟,倒置显微镜下观察,待细胞基本完全脱落后加入完全培养基终止消化,用滴管混匀并将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm/min,离心 5min;
3)用适当量的冻存液(完全培养液: FBS:DMSO=7:2:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期储存(或者按照梯度程序降温模式直接放置-80 度冻存后并转移液氮中长期储存)。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具) ,快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
3)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
三、 公司简介
南京万木春生物科技有限公司(Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向国内外市场专业研发、生产和销售细胞、 外泌体、ELISA 试剂盒、 抗体、重组蛋白及相关试剂。产品在免疫学、信号转导、代谢、 神经科学等领域内都有最前沿科学文献发表,被国内外多所大学、研究机构和药学平台使用并发表文献多达1000多次。我公司凭借优异的产品和完善的服务 体系现已受到广大国内外用户的青睐和认可。
扫一扫,加微信
联系电话:19156044901 (同微信) ,QQ: 3361589519
南京万木春生物科技有限公司
实名认证
钻石会员
入驻年限:2年