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文献和实验
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库存 :9
保质期 :12个月
供应商 : 上海邦景
保存条件 :2-8℃
规格 :1ml/10ml
商品属性:
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
2XRAPA3G全能PCR Mix | BJ-PJ6588 | 1ml | 234 |
2XRAPA3G全能PCR Mix | BJ-PJ6588 | 10ml | 1872 |
产品介绍:
RAPA3G DNA 聚合酶为经电子重构架的第三代 TaqDNA 聚合酶,第三代 DNA 聚合酶具有高度的杂质耐受性、长片段扩增能力、高扩增成功率、高产量,这些特点使得RAPA3G 系列产品可用于粗制样品的直接扩增,无需核酸纯化步骤。该 PCR Mix 具有 5’-3’的聚合酶活性、5’-3’的外切酶活性、3’-5’的外切酶活性,产物部分带有”A“尾巴,部分为平末端,因此产物可用于 TA 克隆或平端克隆。
特点和用途:
(1)高杂质耐受性:该酶可耐受植物中的多糖多酚;全血、血清、血浆中的肝素、高浓度的血红蛋白、甘油三脂、乙醇、胍盐、SDS 等强 PCR 抑制剂。
(2)长片段扩增能力:使用该酶可轻松扩增 8kb 的基因组片段,20kb 的λ DNA,8kb 的 cDNA。
(3) 快速 PCR:该酶具有 6kb/min 以上的扩增速度,可显著的缩短 PCR 的扩增时间,在常规测试条件下,10s 的延伸时间可完成 1kb 的基因组 DNA 扩增。
(4)高 PCR 成功率:与其它类型的 PCR 扩增试剂对比中,RAPA3G PCR Mix 表现出最佳的 PCR 扩增成功率。
(5) 高保真性能:该制品包含一定比例的 RAPA HiFi 超保真 DNA 聚合酶,因此其具有一定的保真性能(经蓝白斑测试,其保真性能约为 Taq DNA 聚合酶的 56 倍)。
(6)热启动,防止非特异性扩增:RAPA3G 系列产品均采用 专有的热启动技术,确保 50 度以下完全无活性,仅有 95 度加热 5min 以后才能恢复其活性,因此可最大限度的提高扩增的特异性,减少非特异性产物的产生。
储存:长期储存置于-20°C 以下,可保存 2 年;短期使用置 于 4°C(3 个月)保存。
使用方法
1. 按下表配制反应体系并混合均匀:
2×RAPA3G PCR Mix 25 μl
上游引物(10 μM) 2 μl
下游引物(10 μM) 2 μl
模板 DNA 或组织材料 X
ddH2O up to 50 μl
注意:当扩增片段>5kb 时,引物用量调整为 0.25-0.5μl。
50ul 体积建议添加的样品量
抗凝全血 2.5ul 培养细胞 >100 个
血清 2.5ul 组织 0.1mg
尿液 2.5ul 毛发囊 1-3 个
血浆 1ul gDNA 1-400ng
植物叶片 2mm cDNA 1-400ng
植物粗提物 2-4ul 质粒 0.1-10ng
2. PCR 扩增循环参数
循环数 温度 时间
预变性 95°C 5min
25-40 Cycles
95°C 20s
50~60°C 20s
72°C 4-6kb/min
末延伸 72°C 2min
请注意:(1)该制品为热启动制品预变性步骤 5min 不可缩短,否则 DNA 聚合酶无法恢复活性。(2)当扩增片段<1kb时,延伸时间使用 15s;扩增片段 1-2kb 时,延伸时间使用45s,扩增片段 2-3kb 时,延伸时间使用 1min,当扩增片段>3kb 时,请按照 2kb/min 的延伸时间进行设置。(3)尽管该酶具有 6kb/min 的延伸速度,但按照 2kb/min 设置延伸时间的条件下,能获得最高的产量。
3. 电泳:1% 琼脂糖凝胶电泳,上样 5 μl,电泳结束在紫外灯下检测条带。
4. 注意事项:(1) 当模板 GC 含量>70%时,请添加5× Q-Solution(Cat. No.: A3002)。(2)当采用全血、血浆等蛋白含量极高的样本时,扩增完毕后可能会有变性的蛋白沉淀,请离心后再进行点样和电泳。
公司正在销售的产品:
载脂蛋白C1(APO-C1)ELISA试剂盒 | APO-C1 ELISA Kit |
载脂蛋白B48(apo-B48)ELISA试剂盒 | apo-B48 ELISA Kit |
载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒 | apo-B100 ELISA Kit |
载脂蛋白A5(apo-A5)ELISA试剂盒 | apo-A5 ELISA Kit |
载脂蛋白A4(Apo-A4)ELISA试剂盒 | Apo-A4 ELISA Kit |
载脂蛋白A2(apo-A2)ELISA试剂盒 | apo-A2 ELISA Kit |
载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒 | apo-A1 ELISA Kit |
载脂蛋白A1(apo A1)ELISA试剂盒 | apo A1 ELISA Kit |
运甲状腺素蛋白/前白蛋白(TTR)ELISA试剂盒 | TTR ELISA Kit |
孕烯醇酮(PREG)ELISA试剂盒 | PREG ELISA Kit |
孕酮受体(PGR)ELISA试剂盒 | PGR ELISA Kit |
孕酮和adipoQ受体家族成员Ⅶ(PAQR7)ELISA试剂盒 | PAQR7 ELISA Kit |
孕酮(PROG)ELISA试剂盒 | PROG ELISA Kit |
孕激素诱导阻断因子(PIBF)ELISA试剂盒 | PIBF ELISA Kit |
孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒 | PROG ELISA Kit |
远端上游元件结合蛋白1(FUBP1)ELISA试剂盒 | FUBP1 ELISA Kit |
原纤维蛋白-1(FBN1)ELISA试剂盒 | FBN1 ELISA Kit |
原钙黏素1(PCDH1)ELISA试剂盒 | PCDH1 ELISA Kit |
鱼精蛋白1(PRM1)ELISA试剂盒 | PRM1 ELISA Kit |
诱导型一氧化合成酶(iNOS)ELISA试剂盒 | iNOS ELISA Kit |
诱导型合成酶(iNOS)ELISA试剂盒 | iNOS ELISA Kit |
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