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文献和实验
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注册证号 :武汉赛奥斯生物科技有限公司
英文名 :RKO-AS-45-1,RKOAS451,RKO_AS45
CAS号 :见详情介绍
库存 :999
供应商 :武汉赛奥斯生物科技有限公司
肿瘤类型 :见详情介绍
细胞类型 :见详情介绍
ATCC Number :见详情介绍
品系 :见详情介绍
组织来源 :见详情介绍
相关疾病 :见详情介绍
物种来源 :人
免疫类型 :见详情介绍
细胞形态 :见详情介绍
是否是肿瘤细胞 :见详情介绍
器官来源 :见详情介绍
运输方式 :常温/干冰
年限 :见详情介绍
生长状态 :见详情介绍
规格 :1×10⁶cells
RKO-AS45-1 人结肠癌转基因细胞
产品编号:CL-580h
细胞特性
含量:>1x106cells;
生长特性:贴壁生长;
细胞形态:上皮细胞样,纺锤形;
规格:T25瓶或者2mL冻存管包装;
用途:仅供科研使用。
细胞运输、保存及注意事项
复苏细胞 |
冻存细胞 |
|
包装 |
充液的T25细胞培养瓶 |
2mL冻存管 |
运输条件 |
常温 |
干冰 |
保存方式 |
75%酒精消毒瓶壁,置于37℃恒温细胞培养箱 |
-80℃冰箱中保存过夜后转入液氮/立即复苏 |
注意事项 |
① 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们; ② 请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照,10X和20X各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据; ③ 贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在运输过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收; ④ 运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代。 |
培养条件
完全培养基 |
EMEM+10%FBS |
培养条件 |
培养温度37℃;气体环境5%CO2+95%空气; |
冻存液 |
50%基础培养基+40%FBS+10%DMSO |
细胞复苏、传代、冻存操作
(一)细胞复苏
① 新制 100mm 平皿 1个,含 12mL 上述培养液;
② 冻存管从液氮或-80℃中取出,37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入安全柜复苏;
③ 用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中,顺时针摇匀;
④ 放入(37℃,5%CO2)培养箱中,过夜换液,2-4天长满。
注意:建议复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩,避免冻存管处于温差较大情况下发生爆炸造成人员伤害。
(二)细胞传代
将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入2mL(/100mm皿/T25瓶)胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA),在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约1min取出。传代用6mL培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可1:2传代。
(三)细胞冻存:
冻存则用3mL冻存液(90% FBS+ 10% DMSO)终止消化,吹打均匀,分为3支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存。
注意事项
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
武汉赛奥斯生物科技有限公司
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