文献支持hiPSC-U2 人诱导多能干细胞

注册证号 ：武汉赛奥斯生物科技有限公司

英文名 ：hiPSC-B1

CAS号 ：见详情介绍

库存 ：999

供应商 ：武汉赛奥斯生物科技有限公司

肿瘤类型 ：见详情介绍

细胞类型 ：见详情介绍

ATCC Number ：见详情介绍

品系 ：原代细胞

组织来源 ：见详情介绍

相关疾病 ：见详情介绍

物种来源 ：人

免疫类型 ：见详情介绍

细胞形态 ：见详情介绍

是否是肿瘤细胞 ：见详情介绍

器官来源 ：见详情介绍

运输方式 ：常温/干冰

年限 ：见详情介绍

生长状态 ：见详情介绍

规格 ：5×10⁵cells

产品介绍

 

    胚胎干细胞一直是干细胞研究中的大明星，因为它能分化成各种器官细胞，具有最广泛的发展潜力。从技术角度来说，"全能性"的胚胎干细胞对于治疗性克隆来说是最理想的。然而，由于人类胚胎干细胞研究触及伦理和道德，在很多国家被法律禁止，相关研究也处于进退两难的境地，iPS细胞又称诱导多功能干细胞的出现解决了这个难题。

武汉赛奥斯生物提供的人诱导多能干细胞（iPS）是由人体细胞通过非整合的方法诱导获得。iPS在无饲养层、化学成分明确、并且无动物源成分的iPSMED人多潜能干细胞培养体系中培养，适合临床级的干细胞研究和应用。iPS在iPSMED人多潜能干细胞培养体系中可以长期稳定快速增殖，具有高度近似人ES细胞的克隆形态和基因表达，长期维持正常核型，并在体内外具有三胚层分化潜能。

货号：SC-DRY0102

规格：1×106 

储存条件：液氮储存

 

产品内容：

组份代码	产品名称	规格	数量
SC-DRY0102	hiPSC-U2 人诱导多能干细胞	1×106	2支
ipsMed-CA012	人多潜能干细胞复苏完全培养基	10mL	2瓶

 

细胞信息：

项目	内容
名称	hiPSC-U2人诱导多能干细胞
来源	37岁男性尿液肾上皮细胞
诱导方式	仙台
规格	1×106

 

生长曲线检测结果：

      细胞增殖良好，倍增时间为24小时，为快速增长型细胞。

注：对于初次培养hiPS细胞的用户来说，本细胞的培养有一定的难度，请阅读本说明书并按照内容进行复苏、培养。

细胞传代条件：

当满足以下条件之一时需要进行传代：

干细胞汇合度达到80%以上；

干细胞集落过大，中央细胞生长不良；

干细胞集落边缘有开始分化的迹象。 

细胞传代比例：

通常初次培养前几代的干细胞需要以较低的比例传代，如1:3；后面可以按照1:4 ~ 1:6的比例传代， 传代的比例由细胞株的生长速率决定。

比较理想的传代时间间隔是3 ~ 6天一次。

细胞传代操作流程： 

1.将人多潜能干细胞完全培养基取出并平衡至室温，取出包被好Matrigel的培养皿/瓶，吸去包 被液并加入适量人多潜能干细胞完全培养基，置于37℃恒温CO2细胞培养箱中。 注：初次进行传代操作的客户，建议将其中一个孔加入复苏完全培养基

2.吸走待传代细胞培养皿/瓶中的人多潜能干细胞完全培养基，并且加入无钙镁的PBS溶液洗一 次。

3.加入人多潜能干细胞消化液使之完全覆盖皿/瓶底。

4.37℃恒温CO2细胞培养箱中孵育5 ~ 10分钟，显微镜下观察到大部分克隆边缘开始脱离皿/瓶底，克隆 内部大部分细胞间出现较为明显的间隙，肉眼观察到细胞集落变得不透明且发白，表明细胞消化时间 理想。

5.吸去消化液，即刻加入新鲜的人多潜能干细胞完全培养基，用移液器扇形吹打培养皿/瓶底， 使皿/瓶底贴附的干细胞集落脱落，轻柔缓慢吹吸混匀。

注：吹吸的力度要轻柔，吹打脱落和吹吸混匀的次数总共不超过10次为宜。吹打过度导致大量单细胞出现 是造成细胞分化或死亡的重要原因。 

注：如有少量细胞无法从皿底脱落，属于正常现象。如有大量细胞无法从皿底脱落，需延长消化时间。 

6. 按照传代比例吸取适量细胞悬液加入已准备好的培养皿/瓶中。

7. 显微镜下观察细胞呈4 ~ 20个细胞大小的团块，水平十字摇匀。于室温放置10 ~ 15分钟。 

8. 显微镜下观察到大部分克隆贴在皿底后将细胞置于37℃恒温CO2细胞培养箱培养。 

9. 每天换液直至达到可以传代的标准。 

细胞冻存 

细胞冻存操作流程： 

1.将准备冻存的细胞取出，弃去培养皿/瓶中的人多潜能干细胞完全培养基，并且加入无钙镁的 PBS溶液洗一次。

2.加入人多潜能干细胞消化液使之完全覆盖皿/瓶底。 

3. 37℃恒温CO2细胞培养箱中孵育5 ~ 10分钟，显微镜下观察到大部分克隆边缘开始脱离皿/瓶底，克隆 内部大部分细胞间出现较为明显的间隙，肉眼观察到细胞集落变得不透明且发白，表明细胞消化时间 理想。 

4. 吸去消化液，加入培养基轻柔吹打细胞于皿底呈小团块脱落，吸取细胞悬液加入15 mL离心管 中200 g，离心5分钟，弃上清后用无血清冻存液（ipsMed-CA009）重悬细胞 注：吹吸的力度要轻柔，吹打脱落和吹吸混匀的次数总共不超过10次为宜。吹打过度导致大量单细胞出现 是造成细胞分化或死亡的重要原因。 注：如有少量细胞无法从皿底脱落，属于正常现象。如有大量细胞无法从皿底脱落，需延长消化时间。 

5. 按照复苏所需要的量，1~5×106 /mL，每管1mL冻存。 

6. 直接转移到-80℃冰箱 

7. -80℃过夜后，将冻存细胞转移至液氮保存。 

细胞复苏 

细胞复苏操作流程： 

1. 将人多潜能干细胞复苏完全培养基取出并平衡至室温；取出包被过人多潜能干细胞 铺底工作液的培养皿/瓶，吸去包被液并加入适量人多潜能干细胞复苏完全培养基，置于37℃ 恒温CO2细胞培养箱中。

2. 37℃水浴解冻细胞，小心摇晃使细胞融化至仅剩一小块冰晶，迅速取出并用75%酒精消毒冻存管外表 面，转移至无菌操作台中。

3. 将细胞悬液转移至新的15mL离心管中，缓慢加入4mL 人多潜能干细胞完全培养基，轻柔吹吸2 次混匀。

4.  200g离心5分钟。

5. 弃上清，加入适量人多潜能干细胞复苏完全培养基重悬细胞，轻柔吹吸2次混匀，并接种到准 备好的培养皿中，显微镜下观察细胞呈4 ~ 10个细胞大小的团块。

6. 水平十字摇匀，于室温放置10 ~ 15分钟。显微镜下观察到大部分克隆贴在皿底后，37℃恒温CO2细胞 培养箱中培养24小时。

7. 弃掉人多潜能干细胞复苏完全培养基，加入新鲜的人多潜能干细胞完全培养基继续 培养，每天更换新鲜的人多潜能干细胞完全培养基。