文献支持小鼠子宫颈癌细胞（GFP标记）(U14-GFP)（国家细胞资源库供应）CCTCC直发

注册证号 ：无

英文名 ：U14-GFP

CAS号 ：请咨询客服

库存 ：大量

供应商 ：中国典型培养物保藏中心（CCTCC）

细胞类型 ：/

ATCC Number ：CCTCC;GDC0316

品系 ：细胞系

组织来源 ：上皮细胞样

相关疾病 ：/

物种来源 ：U14-GFP细胞是由U14细胞转染pEGFP-N1而来，可稳定表达绿色荧光蛋白；U14-GFP细胞可作为报告基因用于外源基因表达研究。

免疫类型 ：/

细胞形态 ：上皮细胞样

器官来源 ：小鼠

运输方式 ：复苏发货/冻存管发货

年限 ：长期

生长状态 ：贴壁生长

规格 ：T25瓶或者1mL冻存管包装

产品由国家实验细胞资源共享平台成员单位

——中国典型培养物保藏中心（CCTCC）提供
专业保藏机构供应，来源清晰，质量可靠

国际保藏机构
中国典型培养物保藏中心（CCTCC）是1985年经国家专利局、教育部批准成立的专业培养物保藏机构。1987年，CCTCC加入了世界培养物保藏联盟(WFCC)，1995年CCTCC经世界知识产权组织(WIPO)批准，成为布达佩斯条约（Budapest Treaty） 确认的国际培养物保藏单位(IDA)，在国际上具有保藏专利培养物的资质。中国目前有3个IDA，除CCTCC外，另两个分别是设在中科院微生物所的中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)和2016年新增的广东微生物所保藏中心。
国家服务平台
2011年，CCTCC分别获批加入“国家微生物资源”和“实验细胞资源”两个科技部的基础平台。CCTCC作为教学实验微生物资源子平台的承担单位，其参加单位还包括南开大学、山东大学、四川大学、云南大学、新疆大学等10所高校，以平台运行模式为社会提供微生物的实物、信息和技术服务。每年涉及200-300家高校和企业单位，并组织培训参观科普等活动传播新技术知识，提高服务质量
权威科研单位
CCTCC现有专职人员9人、聘用人员10人，其中包括教授2人，副教授1人，高级工程师2人。与此同时，中心还聘请武汉大学生命科学学院及药学院的6名教师担任责任教授。迄今为止，已保藏有来自27个国家和地区的各类培养物40,000余株，其中专利培养物12000余株，非专利培养物中微生物菌种30,000余株，微生物模式菌株（Type strain ）1,500余株，动物细胞系1,500余株，动植物病毒 300余株，克隆载体、基因片段和基因文库400余份。
 

泰泽生物为中国典型培养物保藏中心(CCTCC)官方授权代理

贴壁细胞处理方法：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1：2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中，建议冻存一支备用，后续传代根据实际情况按1:2到1:4的比例进行。

悬浮细胞处理方法：

1. 悬浮状态下生长的细胞，可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态；
2. 一般情况下细胞密度维持在1×10^5~1×10^6个/mL（不同细胞对密度要求不同）可以维持细胞的正常生长；
3. 如需分瓶可以将细胞悬液收集到无菌离心管中1000rpm，离心10min；
4. 弃去上清，加入 6-8ml 新鲜培养基，重悬细胞，温柔吹打；
5. 将细胞悬液转移到新T25瓶中，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

冻存步骤：

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x10(6)/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

（以上操作均以T25瓶培养细胞为例）

注意事项

1. 收到常温细胞后，请检查产品包装状况，若发现破损、溢出及污染，请及时联系我们。
2. 先不打开培养瓶盖，用75%酒精处理培养瓶表面，如果是贴壁细胞， 请在培养箱中静置2-3小时（根据细胞密度状况决定）用来稳定细胞状态。如果是悬浮细胞则不需要静置，直接按照悬浮细胞步骤操作。
3. 静置完成后，在显微镜下确认细胞生长状态并拍照记录。（照片能有效帮助我们提供售后服务）
4. 细胞培养过程中如有异常状况，欢迎进行技术交流。