酵母双杂交一对一互作验证

提供商 ：中科圣安

服务名称 ：酵母双杂交一对一互作验证

规格 ：视具体情况而定，详情请咨询

  原理简介：酵母转录因子GAL4包括两个结构域，分别为DNA结合结构域（DNA-binding domain，BD）和转录激活结构域（Activating domain，AD）。BD能够识别位于GAL4-responsive gene的上游激活序列（Upstream activating sequence，UAS）并与之结合，AD可以启动UAS下游的基因进行转录。当BD或AD单独作用时不能激活转录，只有AD和BD在空间上充分接近时，GAL4转录因子才具有活性并激活下游基因的转录。
  该技术利用酵母转录因子GAL4的特性，将AD与X蛋白融合，BD与Y蛋白融合，如果X、Y互作形成蛋白复合物，那么AD与BD会在空间上充分接近，使GAL4转录因子激活并启动报告基因的转录。

实验流程：
①AD与BD载体构建：目的基因克隆或目的基因合成；限制性内切酶酶切骨架载体并纯化；目的基因插入骨架载体；转化大肠杆菌，筛选阳性克隆并测序鉴定；
②共转酵母细胞：将目的AD载体与BD载体共同转化到酵母细胞中；
③二缺培养基培养转化的产物：将共转的酵母细胞均匀涂布在二缺板(SD/-Leu/-Trp)上培养；
④影印三缺和四缺板：将二缺平板上生长的酵母单克隆影印至三缺板(SD/-His/-Leu/-Trp)和四缺板(SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp)上培养；
⑤拍照记录实验结果。


质量保证：
客户的满意是我们的唯一宗旨
  客户购买的每一个产品服务，均享受我们售后服务：
  以下是我们为确保您的满意度而采取的流程顺序：
  1、在项目启动后，前期有专业人员会根据客户提供的具体服务对象分析项目进行中可能存在的问题，会与客户沟通改善服务内容（比如：蛋白表达服务开始前，我们会根据客户的提供的基因序列进行免费的优化服务）。
  2、项目进行中期，我们会定时向客户汇报项目进展情况，并且将项目进行的相关操作进行拍照存档处理，确保后期数据的真实可靠性。
  3、项目结束时，我们向客户提供在服务期产生的一系列原始数据和处理后的组合组（投稿时能直接使用的结果图）。
  4、项目结束后，我们为客户提供保密服务以及售后服务（包括组合图片重新整理、其他技术咨询等）。
  5、每个项目确保按时交付，如遇到项目出现问题需要延期，延期时间沟通确定。


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