产品详情
文献和实验
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保存条件 :避光低温保存
保质期 :6个月
英文名 :锦鲤疱疹病毒Sph基因PCR试剂盒
库存 :大量
供应商 :江西江蓝纯生物试剂有限公司
CAS号 :无
规格 :50次
锦鲤疱疹病毒Sph基因PCR试剂盒产品及特点:
锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus),简称 KHV。因其主要是由 DNA 类疱疹滤过性病毒感染所引起,又名鲤鱼肾炎及鳃坏疽病毒,亚洲地区于 2004年也被报导感染锦鲤疱疹病毒。我国将其列为二类动物疫病,是世界动物卫生组织(OIE)必须申报的疾病。因此对锦鲤疱疹病毒进行快速灵敏的诊断具有重要的意义。
本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的产品,针对聚合酶基因(Sph)进行 PCR 检测。
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增锦鲤疱疹病毒Sph基因,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
6. 本产品由江蓝纯生物提供,不得用于临床诊断。
规格及成分:
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1mL(红盖) |
试剂二 | 超纯水 | 1mL(亮黄色) |
试剂三 | 锦鲤疱疹病毒Sph基因PCR引物混合液 | 100μL(白盖) |
试剂四 | 锦鲤疱疹病毒Sph基因PCR阳性对照(1×10E8 /μL) | 50μL(黄盖) |
试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样品 DNA。
锦鲤疱疹病毒Sph基因PCR试剂盒
使用方法
一、样品 DNA 的制备:
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 锦鲤疱疹病毒Sph基因 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系):
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
成份 | N+2个样品管 | PCR阴性对照 | PCR阳性对照 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20μL | 20μL | 20μL |
锦鲤疱疹病毒Sph基因PCR引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
N+2个样品DNA模板 | 各18μL | -- | -- |
PCR阴性对照(水) | -- | 18μL | -- |
PCR阳性对照(锦鲤疱疹病毒Sph基因PCR阳性对照1000倍稀释液) | -- | -- | 18μL |
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR反应(35个循环) | 95℃ | 30 sec |
55℃ | 30 sec | |
72℃ | 40 sec | |
延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
江西江蓝纯生物试剂有限公司
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