牛布鲁氏杆菌(流产布鲁氏菌)PCR试剂盒

保存条件 ：避光低温保存

保质期 ：6个月

英文名 ：牛布鲁氏杆菌(流产布鲁氏菌)PCR试剂盒

库存 ：大量

供应商 ：江西江蓝纯生物试剂有限公司

CAS号 ：无

规格 ：50次

牛布鲁氏杆菌(流产布鲁氏菌)PCR试剂盒
产品及特点： 
牛布鲁氏菌(Brucella bovis，又叫Brucella abortus) 又叫流产布氏杆菌，是一种革兰氏阴性的不运动细菌，无荚膜(光滑型有微荚膜)，触酶、氧化酶阳性，绝对嗜氧菌，可还原硝酸盐，细胞内寄生，可以在牛体内存活，也能引起人类疾病。一头奶牛如果感染布鲁氏杆菌，没有得到及时的清洁和防疫，布病很快会在牲畜群体里暴发，进而增加人被感染的几率。其特点是生殖器官、胎膜及多种器官组织发炎、坏死和肉芽肿的形成，引起流产、不孕、睾丸及关节炎等症状。感染人后可能导致多个器官或脏器系统，骨骼或关节的病变，感染组织中可观察到具有组织学特征的肉芽肿。晚期可能失去劳动能力、卧床不起、出现神经或精神病方面的症状。因此牛布鲁氏菌的检测具有重要的意义。本试剂盒根据 PCR 原理开发。 
1. 即开即用，用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增牛布鲁氏杆菌（流产布鲁氏菌），与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次，但只能用于科研。
6. 本产品由江蓝纯生物提供，不得用于临床诊断。


规格及成分：

编号	成分	规格
试剂一	PCR MagicMix 3.0	1mL(红盖)
试剂二	超纯水	1mL(亮黄色)
试剂三	牛布鲁氏杆菌（流产布鲁氏菌）PCR引物混合液	100μL(白盖)
试剂四	牛布鲁氏杆菌（流产布鲁氏菌）PCR阳性对照（1×10E8 /μL）	50μL(黄盖)
试剂五	使用手册	1 份

运输及保存： 
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂： 
样品 DNA。
牛布鲁氏杆菌(流产布鲁氏菌)PCR试剂盒
使用方法
 一、样品 DNA 的制备：
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加 10μL牛布鲁氏杆菌（流产布鲁氏菌）PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）： 
3. 对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：

成份	N+2个样品管	PCR阴性对照	PCR阳性对照
PCR Magic Mix 3.0	各20μL	20μL	20μL
牛布鲁氏杆菌（流产布鲁氏菌）PCR引物混合液	各2μL	2μL	2μL
N+2个样品DNA模板	各18μL	--	--
PCR阴性对照（水）	--	18μL	--
PCR阳性对照（牛布鲁氏杆菌（流产布鲁氏菌）PCR阳性对照1000倍稀释液）	--	--	18μL

4. 按下表设置 PCR 反应：

过程	温度	时间
预变性	95℃	5 min
PCR反应（35个循环）	95℃	30 sec
	55℃	30 sec
	72℃	40 sec
延伸	72℃	7 min

三、电泳检测：
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。