产品详情
文献和实验
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库存 :28
英文名 :详见说明书
保质期 : 6个月
供应商 :帛科
保存条件 : 2-8℃冷藏
规格 :100管/96样/50管/48样
公司产品仅供科研实验,不得用于临床诊断!产品名称:细胞色素b5含量生化检测试剂盒
规格:50管/48样、100管/96样
产品分类:P460系列
实验类型:可见分光光度法、微量法
商品详情:
细胞色素b5含量生化检测试剂盒测定意义:
细胞色素P450酶是一组主要存在于肝脏的同工酶,在外源物质代谢中具有重要作用,尤其是药物和毒物的代谢。细胞色素P450和细胞色素b5是P450酶系的两个血红素蛋白,其比值的变化与P450代谢活性密切相关。
测定原理:
氧化型细胞色素b5经连硫酸钠还原后,在424nm处有最大吸收峰,通过测定424nm和490nm处吸光值的差异,即可计算出细胞色素b5的含量。
自备仪器和用品:
普通离心机,超速离心机、可调式移液枪、紫外分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液一:液体100mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;
试剂二:液体20mL×1瓶,4℃保存;
试剂三:液体14uL×1支,4℃保存;
组织样本的前处理:
①总GAPDH酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体GAPDH酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆GAPDH酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中GAPDH酶活性。
建议测定总GAPDH酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的GAPDH,则按照步骤②提取粗酶液。
细菌或培养细胞的前处理
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
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