维生素E生化检测试剂盒

库存 ：25

英文名 ：详见说明书

保质期 ： 6个月

供应商 ：帛科

保存条件 ： 2-8℃冷藏

规格 ：100管/48样/50管/24样

商品属性：

产品名称	规格	实验类型	货号
维生素E生化检测试剂盒	50管/24样、100管/48样	可见分光光度法、微量法	BKS2277

商品详情：

维生素E生化检测试剂盒测定意义 维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，其水解产物为生育酚，是生物体中最主要的抗氧化剂之一，能阻止不饱和脂肪酸收到过氧化作用的损伤，维持不饱和脂肪酸细胞膜的完整性和正常功能，具有延缓衰老、预防溶血性贫血作用，在医药、化妆品、保健品、食品行业具有较高的应用价值。 测定原理 VE还原Fe3+为Fe2+，Fe2+与1,10-菲罗啉产生有色络合物，在530nm有特征吸收峰。 自备实验用品及仪器 天平、研钵、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、漩涡震荡仪。

试剂组成和配制 ：
提取液：液体100mL×2瓶，4℃保存。  
试剂一：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃避光保存。临用前加2mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂三：粉剂×1支，-20℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂四：粉剂×1支，-20℃避光保存。临用前加1 mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂五：粉剂×1瓶，-20℃避光保存。临用前加4 mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
 



 
酶液提取：
①总PGK酶提取：建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液，冰浴匀浆后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，500g离心5min，取上清测定。
②胞浆和叶绿体PGK酶的分离：按照植物组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5～10的比例（建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液），冰浴匀浆后于4℃，500g离心5min，弃沉淀，取上清在4℃，8000g离心10min，取上清用于测定胞浆PGK酶活性，取沉淀加1mL提取液，震荡溶解后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，500g离心5min，取上清测定叶绿体中PGK酶活性。
建议测定总PGK酶活性，按照步骤①提取粗酶液，若需要分别测定胞浆和叶绿体中的PGK，则按照步骤②提取粗酶液。
测定操作
分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
取微量石英比色皿/96孔板，依次加入100μL试剂一，20μL试剂二，10μL试剂三，10μL试剂四，40μL试剂五，20μL粗酶液，充分混匀，记录340nm处10s的吸光值A1和310s的吸光值A2，△A=A1-A2
计算公式
维生素E生化检测试剂盒用微量石英比色皿测定的计算公式如下
（1）按照样本蛋白浓度计算
酶活单位定义：每毫克组织蛋白每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
PGK（nmol/min /mg prot）＝ΔA÷（ε×d）×V反总÷(V样×Cpr) ÷T=321.54×ΔA÷Cpr
（2）按照样本质量计算
酶活单位定义：每克组织每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
PGK（nmol/min /g 鲜重）＝ΔA÷（ε×d）×V反总÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.54×ΔA÷W
V反总：反应体系总体积，0.2mL；ε：NADH摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.02mL；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g
用96孔板测定的计算公式如下
（1）按照样本蛋白浓度计算
酶活单位定义：每毫克组织蛋白每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
PGK（nmol/min /mg prot）＝ΔA÷（ε×d）×V反总÷(V样×Cpr) ÷T=643.08×ΔA÷Cpr
（2）按照样本质量计算
酶活单位定义：每克组织每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
PGK（nmol/min /g 鲜重）＝ΔA÷（ε×d）×V反总÷(W ×V样÷V样总) ÷T=643.08×ΔA÷W
V反总：反应体系总体积，0.2mL；ε：NADH摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，0.5cm；V样：加入样本体积，0.02mL；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g
公司正在销售的产品：
ATP含量测试盒微量法100管/48样
ATP含量测试盒可见分光光度法50管/24样
ATP柠檬酸裂解酶（ACL）测试盒微量法100管/96样
ATP柠檬酸裂解酶（ACL）测试盒紫外分光光度法50管/48样
BCA蛋白法含量测试盒微量法100管/96样
BCA蛋白法含量测试盒可见分光光度法50管/48样
维生素E生化检测试剂盒溃疡棒杆菌PCR检测试剂盒Corynebacterium ulceransPCR
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反刍兽考德里氏体PCR检测试剂盒Cowdria ruminantiumPCR
牛痘病毒PCR检测试剂盒Cowpox Virus(CPV)PCR
伯氏立克次氏体柯克斯体PCR检测试剂盒Coxiella burnetii （）PCR
柯萨奇病毒型变种PCR检测试剂盒Coxsackie Virus(CA24v)A24RTPCR
克里米亚刚果出血热病毒PCR检测试剂盒CrimeanCongo Hemorrhagic Fever Virus(CCHFV )RTPCR
克罗诺杆菌通用PCR检测试剂盒Cronobacter spp.PCR
马克洛菌PCR检测试剂盒Crossiella equiPCR