破骨细胞功能检测专用牛骨片

提供商 ：重庆凝骄生物科技有限公司

服务名称 ：制备破骨细胞功能检测专用牛骨片

规格 ：4mm*4mm*0.3mm/4mm*4mm*厚度定制/材料定制，可选不同动物的牙质

【产品简介】

破骨细胞功能检测专用牛骨片（以下简称牛骨片）包装于无菌的旋转盖封容器内。该骨片已通过紫外线杀菌并且只能在无菌环境中打开。这些骨片外观为边长4 mm的牛骨方片（正常厚度为300μm±10μm）。每批培养基均经过检测以确保能被有功能的破骨细胞重吸收。
【产品用途】
本产品用于破骨细胞的培养，仅供科研使用。牛骨片已被广泛用于研究通过直接分离于骨或培养自骨髓培养基的破骨细胞重吸收功能，这类研究是通过诱导破骨细胞形成，大量功能性破骨细胞能被激活，被激活的功能性破骨细胞将在牛骨片的矿化底层形成吸收陷窝，这些吸收陷窝在显微镜下被量化。该检测已被广泛地应用于研究多种因素对骨重吸收的影响，也是当今体外骨重吸收研究使用最广泛的方法。
【制备方法】
取新鲜牛股骨干致密骨，沿骨纵轴用锯式切片机切成厚约300 μm，4mm × 4mm 大小的薄骨片，使用超声波清洗仪超声清洗10 min，3次;自然晾干‚紫外线照射4～5h后，浸泡于75%酒精中，4℃或常温保存备用。
【使用方法（仅供参考）】
将细胞接种于含有牛骨片的培养板中，在CO2 培养箱中培养60min 左右，取出牛骨片用培养液冲洗以除去未附着的细胞。冲洗后，将牛骨片移入培养板中，并加入各组不同处理培养液继续培养。同时培养液中加入20ng/ml 的M-CSF及20ng/ml的RANKL诱导培养，每天换液一次。培养4-8天后取出骨片‚用0.25％氢氧化铵超声清洗1min，3次‚依次用体积分数为60%、75%、85%、95%和100%乙醇脱水，每级脱水3—5 min，自然晾干‚以1％甲苯胺蓝染色液常温染色3～4min‚蒸馏水清洗后‚光镜下观察。