文献支持透射电镜检测TEM检测

服务名称 ：技术服务-TEM检测

规格 ：上海启高生物科技有限公司

一、透射电镜细胞样品制备技术和观察方法


1、取材
(1)离心法 
(2)原位法 
2、  固定
。
3、  脱水
用系列在室温下脱水。
50% 溶液1次，10分钟。
70% 溶液1次，10分钟。
90% 溶液2次，每次10分钟。
100% 溶液3次，每次10分钟。
4、  浸透
吸弃瓶中脱水剂，
5、包埋
(1)细胞团块 吸取混合包埋剂滴2滴于2号胶囊模块孔的底部，把细胞团块移入胶囊底部中心，注满混合包埋剂，放60℃烤箱烘烤2小时，使之固化成硬块。
(2)细胞薄膜 将预先干燥的EPON明胶囊注满混合包埋剂，倒盖在单层细胞上，在60℃固化24小时。
6、修块 将包埋块安装在特制的夹具上，在显微镜下用单刃刀片修整去除表面的包埋剂，并做记号以便定位。
7、切片 先将包埋块固定在超薄切片机上，切厚约1μm的半薄切片，用苏木素-伊红染色法染色。镜下观察细胞图像，确定进行超薄切片的部位，并作标记。准备φ3mm，150～200目的铜网，用清洗液清洗，并用无水乙醇脱水干燥。制备好支持膜，小心放在铜网上。在超薄切片机上安装三角形玻璃刀，固定包埋块，切取50～70nm厚度的超薄切片，用睫毛笔挑选切片并用钢丝环套取切片，贴在铜网有支持膜的一侧，保存在干燥器皿中待染色。
8、电子染色：