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保质期 :1年
供应商 :湖州河马生物科技有限公司
规格 :5nmol
NPOM-dt嵌入到LbCas12a的crRNA中,评估基于Cas12a的核酸检测是否可以设计为光启动模式。NPOM在胸腺嘧啶的氮杂环中被修饰,并被证明在365 nm紫外光下快速衰减。首先评估了其与非洲猪瘟病毒(ASFV) DNA靶向crRNA光控活性的可行性,通过将不同数量的NPOM-dt (2~6个)插入到该crRNA中,评估其沉默效果和光介导的活性恢复效率,crRNA活性检测基于LbCas12a反式切割,采用经典荧光法。
使用光敏感的6-硝基氧甲基(6-nitropiperonyloxymethyl, 简称NPOM)笼化胸腺嘧啶碱基
NPOM是一种光敏感的保护基团,它可以用来“笼罩”(cage)核苷酸碱基,使其暂时失去功能。在这项工作中,研究人员将NPOM修饰到胸腺嘧啶(thymidine)碱基上,然后将这种被笼化的胸腺嘧啶嵌入到与crRNA互补的寡核苷酸序列中。这样,当这些被笼化的寡核苷酸与crRNA形成复合物时,crRNA的功能被暂时抑制。与PC linker类似,当这种复合物受到光照时,NPOM保护基团从胸腺嘧啶上解离,恢复了胸腺嘧啶的正常功能,进而恢复了crRNA的活性。
简而言之,这句话描述了两种通过光敏感化学修饰临时抑制crRNA功能的策略,这些策略允许研究人员通过光照控制CRISPR-Cas12a系统的活性,为精确的基因编辑和核酸检测提供了新的可能性。
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