Lipo2000转染试剂

保存条件 ：2-8°C储存 避光

英文名 ：Lipo2000 Transfection Reagent

供应商 ：阿拉丁

规格 ：0.75ml/1.5ml

更多产品详情请见阿拉丁官网，该产品链接：https://www.aladdin-e.com/zh_cn/L266177.html产品说明Lipo2000转染效率介于Lip2000和Lip3000之间，毒性更低，转染效率更高，是一种新型的阳离子脂质体转染试剂。适合于将核酸(DNA和RNA)转染入真核细胞，具有低细胞毒性；对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率；转染时血清的存在不影响转染效率的优点。适用范围：贴壁细胞和悬浮细胞（哺乳动物细胞系）的转染。质粒DNA的转染对大多数细胞来说，DNA(µg)与Lipo2000 (µl)的比例为1:2~1:3。转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平，并能减少细胞毒性。1. 以24孔板为例贴壁细胞： 转染前一天，用500 µl不含抗生素的培养基接种0.5～2×10^5细胞，使之第二天能达到70-90%汇合。悬浮细胞：在准备DNA-Lip2000复合物之前，用500 µl不含抗生素的培养基接种4～8×10^5细胞即可。2. 对每个转染样品，进行以下操作a. 在eppendorf管里分别加入50 µl Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和0.8 µg DNA轻柔混匀，制成DNA稀释液。b. 在另一个eppendorf管里分别加入50µl Opti-MEMI ReLipced Serum Medium和2.0 µl Lipo2000(注意用前先混匀)，轻柔混匀，制成Lip2000 稀释液，室温静置5分钟。c. 将DNA稀释液和Lip2000稀释液混合，轻柔混匀，室温静置20分钟， 形成DNA-Lip2000复合物。DNA-Lip2000复合物在室温下可稳定存在6小时。3. 将DNA-Lip2000复合物加入到接种好的细胞中，将培养板轻轻地前后摇动，使复合物分散均匀。4. 在37℃ CO2培养箱中培养4-6小时后更换培养基,继续培养18～48小时。5. 如果要筛选稳定细胞株，则在转染24小时后将细胞按照1:10或更高的比例接种到新鲜培养基中，第二天加入选择性培养基进行筛选。质粒DNA转染的优化 为达到最高的转染效率和降低细胞毒性的影响，可以对DNA和Lip2000的比例以及细胞密度进行优化，一般在1:0.5~1:5的范围内优化DNA (µg)和Lip2000 (µl) 的比例。不同细胞培养板中转染时培养基、核酸及Lipo2000用量常见细胞的转染效率（仅供参考，实验条件不同转染效率会有差别）