产品详情
文献和实验
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库存 ：大量
英文名 ：Soil available phosphorus reagent kit
CAS号 ：WS2430W
保质期 ：3个月
供应商 ：上海瓦兰生物
保存条件 ：4℃
规格 ：96T
本试剂盒仅供科研使用
土壤速效磷含量试剂盒说明书
（货号：WS2430W 微板法 96 样）
一、产品简介：
植物吸收的磷主要是 H2PO4 -的形态，因此土壤中速效磷含量是评价土壤对作物磷供应
能力的一种手段，对于施肥有着直接的指导意义。
本试剂盒采用钼锑抗混合显色剂还原土壤中的速效磷，使黄色的钼锑抗还原为磷钼兰，
在 700nm 下吸光值的大小与土壤中速效磷的含量成正比。
二、试剂盒组成和配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
粉体 g×2 瓶
常温保存
临用前取一瓶转移全部粉末至盛有
450mL 蒸馏水的蓝盖瓶中，再向原试剂
瓶中加入50mL蒸馏水涮洗瓶子后全部
转移至蓝盖瓶中，重复操作一次。总体
积为 0.55L，混匀溶解后 15 天内用完。
试剂一
粉体 g×1 瓶
常温保存
试剂二
A:粉体 mg×1 支
B:液体 8mL ×1 瓶
C:粉体 mg×4 支
常温保存
临用前向 A 中加 1.3mL 蒸馏水溶解后，
全部加入 B 中，再加 3.84mL 蒸馏水，
混匀得到 AB 液（常温可保存 15 天）。
每支 C 中加入 3mLAB 液混合，得到试
剂二（一天内用完）。
标准品
液体 mL×1 支
常温保存
若重新做标曲，则用到该试剂
【注】：全程操作需无磷环境；试剂配置最好用新的枪头和玻璃移液器等，也可以用一次性塑料器皿，
免磷污染。
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、可调试移液器、水浴锅、震荡器。
四、土壤速效磷含量测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备：
称取通过 40 目筛的风干土样 0.5g（精确称量至 0.001g）于 10mL 有盖离心管中，加
入一勺（约 0.05g）的试剂一，加入 10mL 的提取液，盖紧，水平放置在震荡器上室温 200rpm
往复震荡培养 30min，用无磷滤纸过滤，滤液收集至新的 10mL 离心管中，立即进行测定。
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 700nm。
② 在 EP 中依次加入下列试剂：
试剂名称（
μL）
测定管
空白管（仅做一次）
样本
200
提取液
200
试剂二
（逐滴加入，防止溢出）
100
100
观察产生大量气泡，停止冒泡后，盖上管盖上下摇晃后小
心打开盖子放气，重复操作 2-3 次，将气泡全部排出。本试剂盒仅供科研使用
2
蒸馏水
700
700
混匀，室温静置 30min 后，取出 200μL 至 96 孔板中，于
700nm 下读取各管吸光值 A，△A=A 测定-A 空白。
五、结果计算：
1、标准曲线方程：y = 0.0236x + 0.0028，x 是标准品摩尔质量（
μg/mL）, y 是△A。
2、按样本质量计算：
土壤速效磷含量(μg/g )=[(△A-0.0028)÷0.0236×V]÷W
=423.7×(△A-0.0028)
V---加入提取液体积，10mL；
W---样本质量，0.5g。
附：标准曲线制作过程：
1
制备标准品母液（50μg/mL 的磷）。
2
把母液用蒸馏水稀释成六个浓度梯度的标准品：0, 2, 4, 6, 8, 10. μg/mL。也可根据实际样本来调整
标准品浓度。
3
依据测定管的操作方法在 EP 管中加入不同浓度的标准品 200μL，提取液 200μL，试剂二 100μL，
蒸馏水 500μL。根据结果即可制作标准曲线。
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