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文献和实验
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服务名称 :β-半乳糖苷酶染色
提供商 :XSL
规格: 切片 β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子,通过原位染色,在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。实验步骤:
- 用 2 mL D-PBSA 液洗涤细胞(如在 6 孔培养板上)。
- 用 1 mL 固定液于室温下固定细胞 5 min。
- 用 2 mL D-PBSA 洗涤细胞 2 次。
- 将 1 mL 底物/染色液加入到每个培养孔内,37℃ 孵育 2 h。
- 用 2 mL D-PBSA 液冲洗每孔细胞,在倒置显微镜下观察细胞,计数蓝染(β-gal 阳性)细胞。
结果展示:
被β半乳糖苷酶法染色的衰老细胞
注意事项:
- β-Gal Fixative有一定的腐蚀性和气味,操作时请注意防护。
- β-半乳糖苷酶染色反应依赖于特定的pH条件,不能在二氧化碳培养箱中进行染色反应。用于细胞培养的二氧化碳培养箱 中较高浓度的二氧化碳会影响染色工作液的pH值,而导致染色失败。
- 配制染色工作液时需使用聚丙烯(polypropylene)容器或玻璃容器,不宜使用聚苯乙烯(polystyrene)容器。但染色时 可以在聚苯乙烯(polystyrene)容器中进行,例如普通的6孔板就可以用作染色的容器。
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