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文献和实验
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服务名称 :双荧光素酶检测
提供商 :XSL
双荧光素酶报告基因检测介绍实验原理
miRNA通过碱基配对结合到靶mRNA的3’UTR区,抑制靶基因的翻译或对靶基因mRNA的降解达到调控基因表达的目的。将靶mRNA的3’UTR区构建至萤火虫荧光素酶报告基因的3’端,与miRNA表达载体及海肾荧光素酶报告基因载体共转染细胞,先后加入两种底物荧光素,通过对荧光素酶报告基因的表达检测确认 miRNA对靶基因的调控效果。
下图为双荧光素酶报告基因检测载体的示意图。
技术应用
通过miRNA靶标的鉴定从而进行miRNA功能的深入研究。
实验流程
实验结果展示
筛选结果
- 四组质粒的 293 细胞共转染后的细胞照片;
- 四组细胞的双荧光素酶报告基因检测柱形图。
告基因质粒,结果表明待研究的 miRNA 对靶基因有较明显的调控作用。
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