FuniCut™ BclI 快速限制性内切酶

价格： ￥158

品牌：翌圣生物（Yeasen）品牌认证

货号：15004ES62

产品详情

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库存：现货

英文名：FuniCut™ BclI 快速限制性内切酶

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保质期：2年

供应商：翌圣生物科技（上海）股份有限公司

保存条件：-20度

规格：125 T

酶切点位
5'-T↓GATCA-3'
3'-ACTAG↑T-5'

产品简介

FuniCut™系列内切酶是通过基因工程重组技术，可在5～15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶，适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA 等。FuniCut™系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液，从而简化了酶切反应体系，另外，有良好的酶活冗余度，可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。

产品信息

货号	15004ES62
规格	125 T
识别位置	5'-T↓GATCA-3' 3'-ACTAG↑T-5'
推荐反应条件	1×FuniCut™ 缓冲液；最适37℃孵育
酶活	20 U/μL
失活条件	80℃孵育20 min
同裂酶	BsiQI, FbaI, Ksp22I

组分信息

组分编号	组分名称	15004ES62
15004-A	FuniCut™ BclI	125 μL
15004-B	10×FuniCut™ Buffer	1 mL
15004-C	10×FuniCut™ Color Buffer*	1 mL

*10×FuniCut™ Color Buffer包括红色和黄色示踪染料，可将产物直接用于凝胶电泳。FuniCut™ Color Buffer的红色染料与2500 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近；黄色染料与10 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。

储存条件

-25～-15℃保存，有效期2年。

注意事项

1.3 h孵育未表现星号活性，延时酶切可能出现星号活性。
2.受Dam甲基化影响，序列完全重叠，剪切阻断。
3.受EcoBI甲基化影响，序列可能重叠，剪切阻断。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
5.本产品仅作科研用途。

使用方法

1. DNA快速酶切流程
1) 按如下建议的加样顺序配制体系反应液（冰上操作）

组分	质粒DNA	PCR产物	基因组DNA
ddH₂O	15 μL	16 μL	30 μL
10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer	2 μL	3 μL*	5 μL
底物DNA	2 μL (～1 μg)	10 μL (～0.2 μg)	10 μL (5 μg)
FuniCut™ BclI	1 μL	1 μL	5 μL
Total	20 μL	30 μL	50 μL

*本体系指已纯化后的PCR产物。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度，10×FuniCut^TMBuffer加入量可适当减少至2 μL。若下一步进行克隆等实验，酶切前需纯化PCR产物。
2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴。
3) 37℃孵育15 min（质粒），或15～30 min（PCR产物），或30～60 min（基因组DNA）。
4) 80℃孵育20 min 即可使酶失活，停止反应（可选）。
5) 如果使用FuniCut™ Color Buffer进行酶切反应，得到的产物可直接上样电泳。
2. 双酶切或多酶切
1) 每种内切酶的用量为1 μL，并根据需要适当扩大反应体系。
2) 所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。
3) 如果选用的几种内切酶的最适反应温度不同，应先以最适温度低的酶开始酶切，再添加最适温度较高的酶，以较高的温度进行孵育。
3. 质粒的扩大反应体系

组分	体积（20 μL）	体积（20 μL）	体积（50 μL）*
DNA	1 μg	2 μg	5 μg
10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer	2 μL	2 μL	5 μL
FuniCut™ BclI	1 μL	2 μL	5 μL
Total	20 μL	20 μL	50 μL