脑卒中模型

提供商 ：XSL

服务名称 ：脑卒中模型

脑卒中（Stroke）是一种由于各种因素诱发脑内动脉狭窄、闭塞或破裂，造成急性脑血液循环障碍的疾 病，临床上表现为一过性或永久性脑功能障碍的症状和体征。
调查显示，脑卒中危害巨大，每12秒就有一 个中国人发生卒中，每21秒就有一个中国人死于卒中。
脑卒中分为缺血性脑卒中和出血性脑卒中。缺血性脑卒中即为广义的脑梗塞，占脑卒中病人总数的 60%~70%，主要包括短暂性脑缺血发作、脑血栓形成、脑栓塞、腔隙性梗塞、分水岭梗塞。出血性脑卒 中主要包括脑出血、蛛网膜下腔出血等。

脑卒中动物模型是研究脑卒中的发病机制和药物治疗的必要手段和介质，一个好的脑卒中动物模型必须具备：
⑴能够控制缺血的时间、部位、程度；
⑵与脑缺血或出血相关的因素如血压、血气、体温、血糖等可被密切监视或控制；
(3)避免其他疾病和脑血管解剖差异性影响。

脑卒中模型大鼠(四动脉阻断法致全脑缺血)
动物品系:SD大鼠，雌雄不拘，体重250~300g

复制方法 2、颈前正中切口，分离双侧颈总动脉(CCA)，套线备用。同时枕部切口，借助手术显微镜分离暴露第一颈 椎横突翼并找左右横突孔，将灼热的电烙铁尖头接插入翼突孔，深度以2~3 mm为宜，电凝双侧椎动脉 （vertebral artery，VA)造成永久性闭塞，插入时间不宜过长，1〜2s即可，避免造成局部产热过髙而损伤 脊髄和脑干。
3、24 h后用YI醚浅麻醉大鼠，颈部常规消毒，打开颈前正中切口，将套在双侧颈总动脉下的备用线结扎, 根据实验需要可阻断血流10〜60 min。松开结扎线后可实行再灌注研究。
模型特点
本模型是一个能够导致严重的大脑缺血，具有较可复制性的诱发模型，优点是缺血完全，检验缺血是否成 功的指标明确，且可进行缺血再灌注研究，缺点是手术复杂，成功率低，个体差异大，术后存活率为50% 〜80%, 在手术过程中翼突孔的区分是完全阻断VA的关键,在翼突孔前上方有一小切口，若肌肉分离不完 全，易将该切口误认为是翼突孔，若在此处烧灼，不但不能完全阻断VA，而且易烧伤脊髄，甚至脑干，引 起动物立即死亡。

线栓法局灶性脑缺血模型
1986年，日本学者Koizumi J发明了线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型，制备方法是在颈总动脉（CCA） 分叉部或颈外动脉（ECA）残端插入线栓，并推进线栓依次经过CCA分叉/ECA残端—颈内动脉（ICA）颈 段—颈动脉管—ICA脑底段—大脑后动脉（PCA）起始端口—大脑中动脉（MCA）起始端口—大脑前动脉 （ACA）始段。线栓能闭塞ICA血流，进一步阻断进入MCA的血流，引起MCA供血区缺血、梗死。
其优点为：缺血部位恒定，可进行再灌注，模拟了人类永久性及短暂性局灶性脑缺血的不同状态，且不需 要开颅，避免了开颅造成的颅内环境改变或感染，其次，线栓法能对缺血和再灌注时间进行准确控制，手 术难度相对较小，大鼠死亡率和并发症发生率低。目前该动物模型被公认为局灶性脑缺血的标准模型，在 国内外得到广泛运用。
新生大鼠（乳鼠）脑缺血

1. 复制方法 1、7日龄SD大鼠，雌雄不限，体重>12g。吸入YI醚麻醉，仰卧位。

1. 颈部皮肤消毒，行颈部正中新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型切口，分离出左颈总动脉并用7-0灭菌丝线 双线结扎，并于颈部创面点滴2～3滴2.50×10000U/kg体重的庆大霉素，缝合伤口并再次消毒皮肤。
2. 休息30min～2h后，将大鼠置于有机玻璃低氧舱内(30cm×40cm×50cm有机玻璃舱，两侧各有一 1cm×1cm的小孔与外界相通，一侧通氮氧混合气，另一侧与测氧仪相通。
3. 底层铺有钠石灰以吸收CO2及湿气)，输入氧、氮混合气体(氧：8％，氮：92％)。舱内温度控制在 (36±1)℃，湿度为(70±5)％，缺氧时间持续2h。
4. 实验结束后将大鼠放回鼠笼由母鼠行母乳喂养。假手术组分离左颈总动脉后直接缝合皮肤，不予结扎 及入低氧舱。

 

1. 检测指标

2)体重及左右脑重比测定 术后每天上午定时测量每只大鼠体重，观察其体重增长情况，至处死时计算7d内 体重增长率。实验动物在相应时间断头处死，迅速取出大脑，用滤纸轻吸大脑表面的液体和血迹后，去除 小脑，沿大脑纵裂切开左、右大脑半球，分别称取湿重。并计算左、右脑重的比值。
3)病理学检查
大鼠观察至规定时间，行Yl醚麻醉，打开胸腔，用20ml注射器接穿刺针小心插入左心室，注入灭菌生理盐水，同时剪断颈外静脉直至流出的液体变清为止，再注入4%多聚JIA醛/0.1mol/L PBS的固定液20~30ml。
然后断头取脑，并立即将之保存于上述固定液中，固定72h左右。将固定后的鼠脑以视交叉和乳头体中部 为切面行冠状切片，常规脱水及石蜡包埋，切片厚度为3～5μm，常规 HE染色，光镜下观察。也可进行免 疫组化染色进行相应检测。

脑缺血再灌注模型 术前准备见左图，选择 220-250g 的 SD 大鼠，10% 水合氯醛（300uL/100g）麻醉保定，仰卧位，颈部 正中剃毛消毒备用剪开颈部皮肤，钝性分离颈部肌肉，暴露并游离单侧颈动脉，穿线备用。

动脉夹暂时夹闭主动脉，并结扎颈外动脉。主动脉用注射器针头挑开小口，插入自制线栓到颈内动 脉，大约 2.5-3cm。结扎颈内动脉，结扎主动脉近心端，松开动脉夹。

逐层缝合，根据实验的需要的缺血时间进行拔栓手术（再灌注），拔栓时动物要完全麻醉，把出线栓 的长度约为 0.5cm。 模型成功的评判方法 神经功能缺损（NDS）评分
0 分：活动基本正常，无明显神经病学症状；
1 分：左侧前爪无法完全伸展；
2 分：爬行时向左侧转圈；
3 分：行走时向偏瘫侧倾倒；
4 分：不能自动行走，有意识障碍
5 分：死亡
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