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文献和实验
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提供商 :XSL
服务名称 :iTRAQ&TMT
同位素标记定量:iTRAQ(isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation)&TMT(Tandem Mass Tags)
利用多种同位素试剂标记蛋白多肽N末端或者赖氨酸侧链基团,不同分子量的试 剂对不同来源的样品进行标记从而实现不同样品间蛋白质组的比较。
iTRAQ实验步骤:
- 样品准备:将待测样品进行定量计算出样品蛋白浓度;
- 蛋白还原烷基化及酶解:每组样品各取100μg按照iTRAQ试剂盒要求进行处理,使用测序级胰蛋白酶溶液酶解后,超滤管 离心收集酶解肽段;
- iTRAQ标记:将iTRAQ试剂平衡到室温,用150μL异.丙.醇溶解,取酶解肽段加入iTRAQ试剂后室温反应2 h,加入水终止 反应,等量混合不同组样品,真空冷冻干燥样品;
- LC-MS-MS分析:使用Thermo的Q-Exactive Orbitrap进行串联质谱鉴定。
- 数据处理及生信分析
结果展示:
实验周期及交付标准
- 实验周期:4-6周
- 交付标准:蛋白定量结果、鉴定结果、质谱原始数据、生信分析结果(GO分析、KEGG分析等等)
- 样本的种属
- 样本的类型(组织or细胞or血液)
- 样本的数量及分组
- 分析要求
上海联硕生物科技有限公司
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