文献支持羊源性成分PCR检测试剂盒

库存 ：100

英文名 ：Ovis-Derived Material PCR Kit

CAS号 ：/

保质期 ：1年

供应商 ：上海晅科生物科技有限公司

保存条件 ：-20℃

规格 ：50次

羊源性成分PCR检测试剂盒
英文名称：Ovis-Derived Material PCR Kit
本试剂盒可用于检测食品或其他材料中是否有羊的成分。由于很多国家禁 止将羊源性成分作为蛋白添加剂加入到饲料中以避免疯羊病的扩散，因此从饲 料和其他材料中快速灵敏地检测羊成分具有重要的意义。本产品就是为满足这 一需求根据 PCR 原理开发的产品。

产品特点：

1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA。
2. 根据羊源性保守区域设计引物，能专一性地检测出样品中的羊成分，但不能 检测其他非羊成分。
3. 比 ELISA 更加灵敏。对混合样品中羊成分的检测下限为 0.1%，对样品中 羊成分的核酸检测下限为 1.0ng/μL。
4. 快速，整个检测过程（按一个样品计）需 2.0 小时左右。
5. 提供阳性标准品，便于分析实验结果。
6. 只能用于科研，足够 50 次 40μL 体系的常规 PCR。

羊源性成分PCR检测试剂盒包装规格及成分：

编号	成分	规格
试剂一	PCR MagicMix 3.0	1 mL（红盖）
试剂二	超纯水	1 mL（亮黄色）
试剂三	羊源性成分PCR 引物混合液	100 μL（白盖）
试剂四	羊源性成分PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL）	50 μL（黄盖）
试剂五	使用手册	1 份

运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。

自备试剂：DNA 模板


 

使用方法：

一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求 的样品起始量）中加 10μL 羊源性成分 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液 而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰 上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：

成分	N+2 个 样品管	PCR 阴性 对照	PCR 阳性 对照
PCR Magic Mix 3.0	各 20 μL	20 μL	20 μL
羊源性成分 PCR 引物 混合液	各 2 μL	2 μL	2 μL
N+2 个样品 DNA 模板	各 18 μL
PCR 阴性对照（水）		18 μL
PCR 阳性对照（羊源性成分 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液）			18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应：

过程	温度	时间
预变性	95℃	5 min
PCR 反应 （35 个循环）	95℃	30 sec
	55℃	30 sec
	72℃	30 sec
最后延伸	72℃	7 min

三、电泳检测 5. 取 10-20 μL PCR 产物。1%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排 除 PCR 抑制剂的感染。


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